最新第八讲生物氧化.pptVIP

复合物还含有两个血红素、一个细胞色素a和细胞色素a3以及两个铜中心（CuA和CuB）。 * * δ德尔塔 ε伊普西龙 * 线粒体离体实验测得的一些底物的P/O比值 化学偶联假说 构象偶联假说 化学渗透假说 4、氧化磷酸化作用机制 氧化作用（电子传递）与磷酸化作用相偶联已经不存在任何疑问，但对二者究竟如何偶联，尚有许多未完全阐明的问题。共存在三种假说： ① 化学偶联假说 1953年 Edward Slater 最先提出。 观点：电子传递产生一种高能共价中间物, 它随后的裂解释放能量驱动ATP合成。 可以解释底物磷酸化但在电子传递体系磷酸化作用中一直未找到任何一种活泼的高能中间物。 1964年Paul Boyer最先提出。 观点: 电子沿呼吸链传递使线粒体内膜蛋白质组分发生构象变化, 而形成一种高能形式, 这种高能形式通过将能量提供给ATP合成而恢复其原来的构象。 可以解释ATP的生成机制。 ② 构象变化假说 ATP合酶 由亲水部分 F1(α3β3γδε亚基)和疏水部分 F0（a1b2c9～12亚基）组成。 ATP合酶结构模式图 当H+顺浓度递度经F0中a亚基和c亚基之间回流时，γ亚基发生旋转，3个β亚基的构象发生改变。 ATP合酶的工作机制 1961年英国生物化学家 Peter Mitchell 首先提出, 1978年获诺贝尔化学奖。 基本要点：电子经呼吸链传递时释放出的自由能，可将质子（H+）从线粒体内膜的基质侧泵到内膜外侧，产生膜内外质子电化学梯度( H+浓度梯度和跨膜电位差 )，以此储存能量。当质子顺浓度梯度回流时驱动ADP与Pi生成ATP。 ③ 化学渗透假说 膜间隙 琥珀 酸 延胡索酸 基质 化学势差 内碱 电势差 内负 质子驱动力推动ATP合成 内膜 外膜 质子梯度的形成 ATP的合成 当质子从膜间腔返回基质中时，这种“势能”可被位于线粒体内膜上的ATP合酶利用以合成ATP。 细 胞 质 膜间隙 基 质 由于泵出质子，使得基质外侧的质子浓度高于内侧 流动的电子载体 ATP 合 成 酶 膜结合蛋白 复合体 来自NADH 的电子 来自FADH2 的电子 电子传递 产生能量将质子泵出 形成跨膜浓度梯度 ATP合成 利用质子返回膜内驱动ATP产生 线 粒 体 外 膜 内 膜 5、氧化磷酸化的抑制 ① 呼吸链抑制剂 阻断呼吸链中某些部位的电子传递，导致生命活动停止,引起死亡。 鱼藤酮、粉蝶霉素A、异戊巴比妥等:抑制复合物I的Fe-S蛋白。 抗霉素A、二巯基丙醇:抑制Cytb?Cytc1(复合物Ⅲ)的电子传递。 CO、CN-、及H2S等:抑制Cytaa3（复合物Ⅳ）。 ②解偶联剂 作用：使电子传递和ATP形成两个过程分离，只抑制ATP 的形成过程，不抑制电子传递过程和氧的利用, 使电子传递产生的自由能都变为热能。 2, 4 - 二硝基苯酚、双羟香豆素、三氟甲氧基苯腙羰基氰化物等。 2, 4 - 二硝基苯酚破坏跨膜电位 基质 高pH 胞液 低pH 扩散 ③ 氧化磷酸化抑制剂 通过与ATP合酶结合而阻断质子通道, 既抑制呼吸链中氧的利用, 又抑制ATP的生成。 如：寡霉素它能与ATP合酶Fo的亚基结合，抑制H＋转运。由于抑制了从膜间隙流回基质的质子流而阻断ATP合成。 氧化磷酸化的抑制剂 五、线粒体外NADH的穿梭 胞液中的3-磷酸甘油醛，3-磷酸甘油或乳酸脱氢，均可产生NADH。 这些NADH可经穿梭系统而进入线粒体氧化磷酸化，产生H2O和ATP。 1、磷酸甘油穿梭系统 主要存在于脑和骨骼肌中。 NADH通过此穿梭系统带一对氢原子进入线粒体，由于经琥珀酸氧化呼吸链进行氧化磷酸化，故只能产生1.5分子ATP。 线粒体 内膜 线粒体 外膜 膜间腔 线粒体 基质 磷酸甘油穿梭系统 FADH2 NAD+ FAD 甘油-?-磷酸脱氢酶 琥珀酸氧化 呼吸链 二羟丙酮磷酸 甘油-?-磷酸 NADH+H+ 甘油-?-磷酸脱氢酶 2、苹果酸穿梭系统 主要存在于肝和心肌中。 胞液中NADH+H+的一对氢原子经此穿梭系统带入一对氢原子，由于经NADH氧化呼吸链进行氧化磷酸化，故可生成2.5分子ATP。 谷氨酸- 天冬氨酸 转运体 苹果酸-?-酮 戊二酸转运体 胞液 基质 NADH +H+ NAD+ NADH +H+ NAD+ 苹果酸 草酰乙酸 ?-酮戊二酸 谷氨酸 苹果酸 脱氢酶 谷草转 氨酶