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家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-6基因的差异表达分析 中文摘要 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin-6基因的差异表达分析 中文摘要 本研究以家蚕(大造)为研究材料，首先采用半定量RT-PCR方法研究了家蚕在 不同发育时期经LPS(脂多糖)和Bt(苏云金杆菌，Bacillus BmSerpin-6基因的转录水平变化，然后研究了家蚕从幼虫到成虫整个发育过程中不同 蛋白，主要研究结果如下： 升后下降的趋势，但转录水平上升至最高点的时间不一样：其中LPS刺激四龄眠蚕 6hBmSerpin-6转录水平最高，LPS刺激五龄起蚕9hBmSerpin-6转录水平最高；Bt 刺激四龄眠蚕3h BmSerpin-6转录水 BmSerpin-6转录水平最高，Bt刺激五龄起蚕6h 平最高，Bt刺激五龄三天蚕9h BmSerpin-6转录水平最高。实验结果进一步说明了 基因转录水平在前期都显著上调；同一种刺激物刺激不同发育时期的家蚕，转录水平 上升至最高点的时间不一样，我们推测可能是由于不同发育时期的家蚕抗性水平不一 致，受不同刺激物诱导家蚕生理代谢受影响的程度不一致。 (二)BmSerpin-6基因在家蚕不同发育时期的转录水平具有明显的时空特异性： 龄眠蚕转录水平明显高于五龄起蚕。 录水平很低，5龄4d转录水最低，后逐渐升高，在5龄6d达到最高。 时间的延长转录水平逐渐上升： 蛹6d最高，化蛹13d最低。成虫期BmSerpin-6转录水平与刚化蛹时接近。 势。 中文摘要 家蚕丝氨酸蛋白酶抑制剂serpin-6基因的差异表达分析 由此看来，BmSerpin-6除了参与免疫反应，可能还具有其它生理功能。 SDS和WesternBlot分析，结果在46kD左右出现一条特异性条带，与预计融 合蛋白大小相符，说明目的蛋的得到了表达。为进一步研究BmSerpin-6的功能打下 了物质基础。 本文通过两种诱导物刺激4龄眠蚕、5龄起蚕和五龄3d蚕，系统地研究了家蚕 动态发育过程中BmSerpin-6基因的转录水平与免疫刺激的关系，实验结果说明 性免疫；通过对家蚕整个发育过程中不同阶段BmSerpin-6基因转录水平进行研究， 结果表明，BmSerpin-6除了参与调节免疫作用以外，可能还具有其它生理功能；最 后通过真核表达接近天然蛋白活性的BmSerpin-6，为其功能研究提供了物质基础。 关键词：家蚕；Serpin-6；基因转录；表达谱；真核表达 作 者：俞燕芳 指导老师：许雅香 Ⅱ Profile of of mori ExpressionanalysisSerpin-6geneBombyx Abstract a their awide Serpingenescompriselargegenefamily，andproteinproductsregulate of functions．Inorderto thefunctionof varietyproteinse-depentphysiological study in mori，the levelof atdifferent BmSerpin-6geneBombyx transcriptionalBmSerpin-6 andlarvae