鸡tlr4不同变基因型对抗肠炎沙门氏菌感染的差异.pdfVIP

摘要 肠炎沙门氏菌可以感染雏鸡并引发死亡，是造成食品安全隐患的人畜共患病菌。肠炎沙门氏 诱导促炎基因的表达，介导机体炎症反应并产生抗菌作用。为阐明鸡TLR4．My088跨膜信号转导 通路的机制以及筛选具有抗菌作用的突变位点，本研究开展以下试验： 试验一：采用同源模建的方法获得鸡TLR4蛋白胞外段和MD-2蛋白的三维结构，以小鼠和 酸突变引起TLR4蛋白分子内氢键数量减少和突变位点周围蛋白二级结构改变，突变后蛋白空间 构象稳定性变差。 试验二：从鸡脾脏cDNA中扩增875bp 问接ELISA，3次亚克隆和Western Blot特异性检测排除针对MBP蛋白的杂交瘤，获得三株可以 轻链均为1C，抗体效价均为l：2x105。 IgGl、IgG2a， 试验三：在分析301和6ll突变位点对蛋白空间结构影响的基础上，以SPF鸡为素材，对该 菌剂量为0．5mLX 108CFU／只，攻菌后1-5DPI分别进行组织载菌量测定，并用WesternBlot进行 蛋白表达量相对较高，可能对肠炎沙门氏菌的抗性较强。 关键词：鸡，肠炎沙门氏菌，TLR4信号通路，同源建模，MyD88单抗制备 Abstract S．enteritidisisa bacteriumwhichcallinfectand thebroilerto non-host-specificpathogenic trigger dieand inhiddentroublesoffood theaidofthe bring sec--arity．Toll-likereceptor4(TLR4)，埘m LBP， CDl4and a thatfunctionsas and MD-2，is receptor recognition whose activationresultsinthe ofseveral and production anti-bacterial pro-inflammatory,antiviral orderto themechanismofthe eytokines．In transduction study TLR4／MyD88-dependent signaling andfindthe functionalmutation three pathway sites，weperformedexperiments． wasconductedto thethree-dimensionals自mctIlreoftheexocellularsectionof [Triall】Study get theTLR4andtheMD-2．TheTLR4一MD．2heterodimersofthemouseand thehumanservedas tosimulate也estructure templates oftheTLIH．MD-2heterodimerofthechickenwiththeZDOCK