FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和 cyclin E1 mRNA表达的影响.pdfVIP

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2016-02-27 发布于安徽
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FSH对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA和 cyclin E1 mRNA表达的影响.pdf

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中国农业科学 2013,46(6): 1237-1246 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.06.018 FSH 对体外培养仔猪睾丸支持细胞cyclin D1 mRNA 和 cyclin E1 mRNA 表达的影响 1 1 1 1 1,2 1 1 张姣姣 , 王怡 , 张会琼 , 孙思 , 孙燕 , 王鲜忠 , 张家骅 1 2 （西南大学动物科技学院/重庆市牧草与草食家畜重点实验室，重庆 400716 ；重庆市动物疫病预防控制中心，重庆 401147 ）摘要：【目的】确定FSH 是否能调节支持细胞cyclin D1 mRNA 和cyclin E1 mRNA 的表达及可能的机制。【方法】以培养的仔猪睾丸支持细胞为试验材料，通过添加各种信号通路的抑制剂，应用实时荧光定量PCR 检测cyclin -1 D1 mRNA 和cyclin E1 mRNA 的相对表达量。【结果】不同浓度的FSH （0—100 ng·mL ）均可促进cyclin D1 mRNA -1 -1 和cyclin E1 mRNA 的表达（P＜0.05），在FSH 浓度为50 ng·mL 时两种基因的表达量最大（P＜0.05）；FSH（50 ng·mL ）也以时间依赖的方式促进了cyclin D1 mRNA 和cyclin E1 mRNA 的表达（P＜0.05），在作用30 min 时其表达量达 -1 到高峰（P＜0.05）。不同浓度的 Foskolin （0—20 μmol·L ）均可以促进 cyclin D1 mRNA 和 cyclin E1 mRNA -1 的表达（P＜0.05），但均低于FSH 单独作用时两种基因的表达量；Rp-cAMP （0—40 μmol·L ）、H-89 （0—30 μ -1 -1 mol·L ）和Verapamil （0—100 μg·mL ）以剂量依赖的方式抑制了FSH 诱导的cyclin D1 mRNA 和cyclin E1 mRNA 的表达（P＜0.05），而且Rp-cAMP 和Verapamil 联合作用对FSH 的抑制效果高于单独的抑制效果（P＜0.05），但 -1 低于两者之和。此外，不同浓度的U0126 （0—10 μmol·L ）降低了FSH 诱导的cyclin D1 mRNA 和cyclin E1 mRNA