h1-calponin基因对五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外成骨分化的影响.pdfVIP

中国农业科学 2013,46(17):3688-3694 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2013.17.018 h1-calponin 基因对五指山小型猪骨髓间充质 干细胞体外成骨分化的影响 何 微, 吴添文, 黄 雷, 赵为民, 夏 颖, 唐 芳, 牟玉莲, 李 奎 （中国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京 100193) 摘要：【目的】通过碱性调宁蛋白（h1-calponin）基因与五指山小型猪骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BM MSCs）成骨分化关系的研究，探讨成骨分化机制。【方法】添加成骨分化液对BM MSCs 进行成骨分化诱导，采用茜素红染色的方法鉴定细胞成骨分化的程度；通过定量PCR 分析h1-calponin 基因及成 骨相关基因骨桥蛋白（osteopotin，OPN）、骨钙蛋白（osteocalcin，OCN）、核心结合因子α1 （core binding factor a1，Cbf α1）及核心结合因子β（core binding factor beta，Cbf β）表达谱。【结果】①随着诱导时间的延长， 茜素红染色矿化结节逐渐增多；②成骨标志基因OPN 和OCN 表达趋势一致：诱导0 至14 d，基因表达量呈增长趋 势，诱导14 d 表达量最高，而后下降；成骨相关基因Cbf α1 和Cbf β表达量于第7 天达到最高峰，之后逐渐下 降，但仍高于诱导前；③h1-calponin 基因表达量随着诱导的延续逐渐下降；诱导14—21 d 时，该基因基本不表 达。【结论】h1-calponin 基因的表达与五指山小型猪骨髓间充质干细胞体外成骨分化存在着负相关，可能是成骨 分化的负调控基因。 关键词：碱性调宁蛋白; 骨髓间充质干细胞; 成骨分化; 负调控 Effect of h1-Calponin Gene on in Vitro Osteogenesis Differentiation of Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells of Wuzhishan Minipig HE Wei, WU Tian-wen, HUANG Lei, ZHAO Wei-min, XIA Ying, TANG Fang, MU Yu-lian, LI Kui (Institute of Animal Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 100193) Abstract: 【Objective 】 The objective of the present study is to explore the relationship between h1-calponin gene and osteoblast differentiation of Wuzhishan minipig’s bone marrow mesenchymal stem cells (BM MSCs) and further understand the mechanism of osteoblast differentiation. 【Method 】BM MSCs were induced to osteoblast differentiation by adding osteogenesis differentiation medium. Alizarin Red staining was used to indentify the degree of osteoblast differenti