hLF转基因羊繁殖、遗传与表达稳定性.pdfVIP

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2016-02-27 发布于安徽
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中国农业科学 2012,45(13):2737-2742 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2012.13.018 hLF转基因羊繁殖、遗传与表达稳定性 1,2 2 1 1 1 2 1 2 乔娜 , 徐旭俊 , 刘思国 , 王学斌 , 俞慧清 , 童永星 , 陈建泉 , 成国祥 1 2 （上海转基因研究中心，上海 201210 ；上海杰隆生物工程股份有限公司，上海 201210 ）摘要：【目的】分析转基因对人乳铁蛋白（human Lactoferrin，hLF）转基因羊繁殖性能的影响，及转基因在不同世代中的遗传与表达稳定性。【方法】应用自主研发的原代hLF 转基因山羊（G代公羊）建系，与普通奶山 0 羊常规交配获得F 代；F 代公羊与F 、F 代母羊或普通奶山羊（N）交配获得F 代；F 代公羊与F 代母羊交配获得 1 1 1 2 2 2 2 F3 代。分别采用 PCR 和 ELISA 方法对其后代个体进行整合与表达鉴定；统计各世代不同配种方式所获得的后代数量、转基因整合率、母羊受胎率、羔羊异常率等繁殖性能数据。【结果】经过多个繁殖周期，各世代转基因羊受胎率、产羔率等繁殖性状均正常。获得 F 代 hLF 羊 19 只，转基因整合率为 24.7%（19/77）；F 代 hLF 羊 86 只，其 1 2 中通过（F♂×N♀）交配方式获得的是 62 只，转基因整合率为 33.2%（62/187）；通过（F ♂×F ♀）交配方式获 1 1 1 得hLF羊16只，转基因整合率为76.2%（16/21）；通过（F♂×F ♀）交配方式获得hLF 羊8只，转基因整合率为 1 2 34.8%（8/23）；获得F 代hLF羊9只，转基因整合率为52.9%（9/17）。ELISA方法测定F 、F 、F 代羊泌乳20周 3 1 2 3 乳汁中hLF的表达发现，hLF在转基因羊乳汁中稳定表达，3个世代hLF羊乳中的平均表达量分别为351.75、340.00 和326.25 μg·mL-1 。【结论】hLF基因的转入未对转基因羊群的繁殖性能产生显著影响，h