干旱胁迫下小麦（Triticumaestivum L.）幼苗中ABA 和IAA的免疫定位及定量分析.pdfVIP

中国农业科学 2014,47(15):2940-2948 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2014.15.004 干旱胁迫下小麦（Triticumaestivum L.）幼苗中ABA 和 IAA的免疫定位及定量分析 1 2 1 1 1 1 张 炜 ，高 巍 ，曹 振 ，何丽珊 ，谭桂玉 ，王保民 1 2 （中国农业大学农学与生物技术学院，北京 100193； 河南农业大学资源与环境学院，郑州 450002 ） 摘要：【目的】干旱是农业生产中存在的严重问题，是制约作物生长和限制农业种植面积进一步扩大的最主 要因素，探明植物抗旱机理，将为农业增产增收提供重要保障。本试验旨在分析干旱胁迫下小麦幼苗中 （根、叶 鞘、叶片）脱落酸（ABA ）和吲哚乙酸（IAA）的定位及含量，探索其动态变化规律，为干旱地区作物栽培的激素 调控、干旱条件下小麦的化学调控提供理论依据。【方法】以冬小麦品种鲁麦21 号为材料，采用温室盆栽自然干 旱法，以免疫组织化学定位方法研究干旱胁迫下小麦幼苗（根、叶鞘、叶片）中内源激素ABA 和 IAA 的定位，并 用间接酶联免疫吸附测定法（icELISA）进行内源ABA 和IAA含量分析。通过比较免疫组织化学定位的化学信号强 度和 icELISA检测的内源ABA 和IAA含量，验证本试验结果的有效性。【结果】称重法控制水分持续干旱4 周后， 对照组 （CK ）小麦植株直立生长，叶片健康呈绿色，长势良好。干旱处理组（ND ）小麦植株矮小，叶片面积减小, 有不同程度的萎蔫和发黄现象。干旱胁迫下小麦幼苗根、叶鞘、叶片中的ABA 免疫组织荧光信号均强于对照，其 中叶片强弱差异最显著，叶鞘次之，各器官中保卫细胞和维管的强弱对比最为明显；IAA 免疫荧光信号强度也高 于对照，但相比ABA 不明显；用 icELISA进行定量分析，比较免疫组织化学定位的信号强度和 icELISA检测的内 -1 源激素含量表明，上述免疫组织化学定位结果与icELISA 的测定结果相一致，其中，根中的ABA 含量为61.51 ng·g FW， -1 -1 是对照的2.82 倍（21.8 ng·g FW ）；叶鞘中ABA 含量增加幅度较大，为 175.35 ng·g FW，是对照的3.65倍（48.02 -1 -1 -1 ng·g FW ）；叶片中ABA 含量增幅最大（512.12 ng·g FW ），为对照的10.16 倍（50.42 ng·g FW ）。显著性分 析表明，干旱胁迫与正常供水小麦幼苗根、叶鞘、叶片中 ABA 含量差异均呈极显著（P＜0.01）。用icELISA 对 -1 IAA 进行检测，正常供水时，小麦幼苗根、叶鞘、叶片中的 IAA含量分别为72.81、274.46 和195.75 ng·g FW。