小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素的测定与分析.pdfVIP

中国农业科学 2009,42(2):446-453 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2009.02.008 小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素的测定与分析 徐春英，李玉中，梅旭荣，钟秀丽 （中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所/农业部旱作节水农业重点开放实验室，北京 100081 ） 摘要：【目的】利用气相色谱-燃烧-同位素比值质谱仪 （gas chromatography-combustion-isotope ratio mass spectrometry，GC-C-IRMS）测定小麦籽粒氨基酸碳氮稳定同位素组成。【方法】以小麦临汾 50744 为材料，水解 得到其籽粒蛋白质氨基酸，将氨基酸标准样品以及小麦籽粒氨基酸衍生化为 N-新戊酰基，O-异丙醇 （N-pivaloyl-isopropyl，NPP）氨基酸酯，利用 GC-C-IRMS 测定其碳氮稳定同位素组成。【结果】氨基酸标准样 品的碳氮同位素组成分析表明，NPP 氨基酸酯的平均重现性δ13 15 C 为 0.47‰，δ N 为 0.28‰，并没有产生大的同 位素分馏，因此δ13 15 C和δ N都能得到满意的测定结果。运用GC-C-IRMS 测定了小麦临汾50744籽粒蛋白质氨基酸 的稳定碳氮同位素的自然丰度，其中δ13 15 C的变化范围在-28.7‰到-34.7‰，δ N的变化范围为-6.2‰到9.5‰。 采用系统聚类分析进行分类，根据δ13 15 C 可以将氨基酸分为两类；根据δ N 可以将氨基酸分为三类。【结论】运用 GC-C-IRMS 结合 NPP 氨基酸酯衍生物可以测定小麦籽粒氨基酸的稳定碳氮同位素，这对于揭示氨基酸代谢途径的 差异以及逆境胁迫下氨基酸的合成差异具有重要的意义。 关键词：GC-C-IRMS；NPP氨基酸酯；δ13 15 C；δ N Measurement and Analysis of Stable Carbon and Nitrogen Isotope of Amino Acids in Wheat Grain XU Chun-ying, LI Yu-zhong, MEI Xu-rong, ZHONG Xiu-li (Key Laboratory of Dryland Farming and Water Saving, Ministry of Agriculture, Institute of Environment and Sustainable Development in Agriculture, Chinese Academy of Agricultural Science, Beijing 100081) Abstract: 【Objective 】 To measure the stable carbon and nitrogen isotope composition of amino acids in wheat grain by gas chromatography-combustion-i