适于甘薯淀粉高l-乳酸米根霉菌株的选育.pdf

适于甘薯淀粉高产L一乳酸米根霉菌株的选育 摘 要 乳酸是食品、医药、化工等工业领域中广泛应用的一种重要有机酸，高 光学纯度乳酸具有极高的商业价值，而获得高品质乳酸的关键需要有优良的 生产菌株。 本文运用代谢控制育种理论和发酵工程的相关原理，进行了适于甘薯淀 粉高产L一乳酸米根霉菌株的分离、诱变选育及其稳定性考察的研究，探讨了 代谢过程中关键酶乳酸脱氢酶的性质以及发酵条件的变化对其活性的影响。 实验研究的主要结论如下： 1、建立了适于甘薯淀粉产L一乳酸米根霉的分离和诱变选育的系列平板初 筛方法，在提高诱变育种效率的同时，有效地解决了诱变选育过程中丝状真 菌蔓延生长的问题； 2、采用紫外线(UV)、硫酸二乙酯(DES)对米根霉进行诱变处理，筛选 其产酸分别为130．79／L、126．4 g／L，对糖的转化率为83．9％、81．1％，产量 分别提高了10．2％和8．8％： 3、通过对米根霉代谢过程关键酶～乳酸脱氢酶(LDH)的研究，找到了 温度、pH、不同离子及离子的不同浓度对乳酸脱氢酶活性的影响规律，并测 定出该来源乳酸脱氢酶的米氏常数：NADH为底物的米氏常数为 7．22x10～mol／L，丙酮酸为底物的米氏常数为1．24xlO mol／L： 4、在米根霉发酵甘薯淀粉生产L-乳酸过程中，LDH的动态特性表明，乳 酸脱氢酶LDH的活性与发酵产酸水平及原料的转化率具有一定的相关性。 关键词：米根霉诱变L-(+)一乳酸乳酸脱氢酶 acid Oryzae ofL-Lactic Rhizopus Screening highlyproducing thesweet starch strain to potato adapting ABSTRACT used itsfermentation isakindof acid．Increasing Lacticacid widelyorganic straintosome canbeobtained themicrobial extend，which Droductionon by depends and fromenvironment screening mutagenization， metabolic fermentation strain and tothe theory controlling According screening of and ofL—Lacticacid mutant RhizopusOryzae theory，thes