飞蝗触角中气味子结合蛋白的定位与结合特性.pdfVIP

摘 要 manilensis触角中可能的气味分子 本文利用生物化学方法研究了东弧飞蝗三。cm幻migratoria 结合蛋白(odorant-binding 性，还通过透射电镜观察了几种主要触角化学感受器的超微结构。并采用免疫细胞化学定位技术 观察分析了这种蛋白在触角感受器中的精确分布，以初步探讨可能OBPs的生理功能和东弧b蝗 对气味的接受机制。主要取得了如下结果： 1．可能的OBPs仅在触角中存在，具有水溶性，分子量较低(约15kDa)。 2．利用凝胶过滤。离子交换色谱和电泳等方法纯化可能的OBPs，制备相应抗体，免疫印迹试验 表明此抗体与东亚飞蝗触角蛋白具有特异性反应(约15kDa条带)：与东亚飞蝗重组OBP也 有特异性免疫反应。 可能OBPs的荧光强度降低：配基与蛋白共存时最强荧光的波长发生蓝移，由原来的480纳 米转为407纳米左右，表明该纯化的蛋白质可以与配基结合。 4．观察了东亚飞蝗触角上的锥形感受器(甄型A和B)、毛形感受器、腔锥形感受器(距型A 和B)和刺形感受器的表皮壁、表皮孔、树突、微管等超微结构。 5．免疫细胞化学试验结果表明，可能的OBPs聚集于触角上锥形感器、毛形感器和无纵脊的腔 锥形感器内部的感受器淋巴液中，表皮孔道中也有存在。 东皿飞蝗的为害很大程度上是由于它的某些生物学行为，这些行为又与其气味感受密切相 关。可能OBPs于触角中特异性的存在以及它在感受器内的分布表明这种蛋白与昆虫的气味感受 有关。本文通过对可能OBPs的存在、分布的观察研究和结合特性的研究，为有效调控东亚E蝗 的行为，为控制蝗害提供新的思路与途径，进而形成蝗害可持续综合治理的新手段奠定理论基础。 关键词：东亚飞蝗。气味分子结合蛋白，触角，感受器，免疫细胞化学定位 国家教育部骨干教师资助计划项目(GG．210．10019—1012) Abstract The of antennaeofLocusta purificationputativeodorant-biodingproteinsroaPs)from migratoria manilensiswas with and The ofthe performedfiltration，HPLC gel electrophoresisgeneralproperties werecharacterized．Localizationofthe OBPswasconducted proteins putative byusing afterobservationonultrastmetureofantennalsensilla． immunocytochemicaltechniques Theresultsareasfollowings： 1．Thc OBPswere and putative purifiedthroughgelfiltration．anion-exchangechromatography intheantennaeare molecule soluble OBPs lower electrophoresis．Theputativeonlypresenting 15kDa)． wefght(about 2．Theantisera the OBPswereobtained ofthe