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饲用纳豆芽孢杆微生态制剂的研制与开发

饲用纳豆芽孢杆菌微生态制剂的研制与开发 摘要 纳豆属功能食品,纳豆菌是农业部批准的可用于饲料的微生物菌种之一。本文进行了纳豆 苗的分离鉴定、筛选;研究了以豆粕为主要原料,生产纳豆菌饲用微生态制剂的生产_[艺,并 进行了发酵产物的营养和功能评价;在此基础上进行了中试及中试产品的动物喂养试验,得到 以下结果: (1)菌株分离和分子鉴定。共分离了7个菌株,对其中4个菌株H口“01,3,4,6和标准 菌株月口“DO做16srDNA测序,结果表明所测菌株与GenBank报道的纳豆芽孢杆菌B∞!ffm s“6f如s“6印m删o(AY608741)16srDNA同源性达到99%,表明属纳豆芽孢杆菌。 (2)菌株筛选。通过菌株对温度、pH和通气的耐受性进行筛选。结果显示不同菌株间耐 热、耐酸、耐缺氧差异显著,其中菌株4综合性能最佳,适合作为生产菌株。通过对纳豆菌生 存性能观察,发现该菌对胆盐有较强的耐受性,对青霉素敏感,且对大肠杆菌和金黄色葡萄球 菌具有抑制作用。 (3)固体发酵和干燥工艺。固体发酵生艮曲线图表明发酵16h时纳豆菌数达到高峰。工 艺优化结果表明,当豆粕禽水量60%,浸泡水口H6,5,添加NaC}030%,葡萄糖5%,明 min 胶5%时较适合纳豆菌生长:发酵豆粕与玉米粉的适宜配比为1:1;产品在65℃以下,60 以内干燥活菌数变化不显著,75℃以上的高温处理会导致活菌数显著下降。 (4)豆粕发酵过程中营养功能成分变化分析。结果表明,发酵后酸性蛋白酶酶活和肽的 含量提高,其中酸性蛋自酶酶活在发酵12h时含量达到最高,肽含量在发酵J4~16h时达到 最高。发酵后蛋白质含量有所。r降。经过16h发酵,部分蛋白质降解,使培养基中增加了分 子量介于256l~4000的肽类,绝大部分肽的分子量由发酵前的1100降低至800以下。 (5)产品的中试、营养评价和I动物试验。按照优化得到的生产工艺进行了中试,中试产 品的纳豆菌含量为7.5×108cn垤,高于农业部标准(1×108cfu惶)。与发酵前相比,产品的肽、 v&和毗啶__二羧酸的含量均有大幅度提高。饲料中添加2k虮的中试产品后,能使仔猪日增重 增加53.56%,料重比降低20.82%;并在一定程度上抑制仔猪肠道大肠杆菌,促进双歧杆菌和 乳酸杆菌的生长。 关键词:纳豆芽孢杆菌,豆粕,微生态制剂,分子鉴定,生K性能 Abstract Nattoisakind one thatwaS tobe offunctjonalB&ci??埘口加js food,and ofpmbiotjcspermiHed usedin姐imalfeed this and thesis,theisolation,identificanJion bySta把Ag—cuItura】Department.In sele“ionofZkc盯f淞no肋s仃alnswerecarrjedthe of曰∞Ⅲ蚶”口盯D ouL producingtechn0109y contained forfeed mealasthemajnrawmaterjalwas the product bysoy_been researched,and al were nutritiona11dfunctional ofthe肋c洲凇n口肋fe丌TlentedeValuated.On pmperties product t11ese

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