脂多糖对奶山羊肝脏代谢组学的影响.pdfVIP

中国农业科学 2015,48(18):3701-3710 Scientia Agricultura Sinica doi: 10.3864/j.issn.0578-1752.2015.18.013 脂多糖对奶山羊肝脏代谢组学的影响 1 1 2 1 1 3 1 1 王林枫 ，贾少丹 ，杨改青 ，朱河水 ，柳如意 ，严 平 ，李 明 ，杨国宇 1 2 （河南农业大学牧医工程学院/农业部动物生化与营养重点实验室，郑州 450002 ； 河南农业大学现代实验技术与管理中心，郑州 450002 ； 3 河南省商丘市动物疫病预防控制中心，河南商丘 476000 ） 摘要：【目的】探寻脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）影响奶山羊肝脏营养代谢的特征代谢物（生物标记 物），阐明 LPS 引起肝脏代谢障碍的机制。【方法】选择 12—18 月龄，体重 24—28 kg 的关中奶山羊 15 只，平均 分为3组（每组5只），分别为对照组（CTL）、低剂量LPS 处理组（LPS-L）和高剂量LPS处理组（LPS-H）。LPS-L 和 LPS-H 分别腹腔注射 20、40 μg·kg-1 BW 的 LPS 溶液，CTL 注射等容量生理盐水。24 h 后, LPS-L 和 LPS-H 追 加LPS溶液。48 h后，静脉采血，分离血浆和血清，检测血液相关生化指标；然后活体采集肝脏组织，液氮保存。 肝脏组织冻干后，用氢核磁共振（1 1 H-nuclear magnetic resonance, H-NMR）技术检测肝脏组织代谢物，运用数据 库对检测到的代谢物变量进行化合物种类鉴别，再用模式识别方法中的偏最小判别二乘分析法 (partia1 1east squares discriminant analysis，PLS-DA) 筛选生物标记物。【结果】血清生化指标表明，LPS-L 和 LPS-H 处理 的谷丙转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）水平较CTL显著升高(P0.05)；甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸（NEFA）、 总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白(LDL)、白蛋白(ALB)和总蛋白(TP)的含量较 CTL 显著降低 ( 1 P0.05)。用 H-NMR 技术共检测到 69 种代谢物变量，包括氨基酸，醇类，糖类及其它代谢产物。PLS-DA 分析发 现，代谢物变量可将CTL、LPS-L与LPS-H组之间聚类区分，并找到9种组间差异显著的代谢物，这些代谢物主要 与氨基酸、脂肪和碳水化合物等代谢途径相关，可作为肝脏在LPS诱导损伤状态下的标志物。【结论】LPS可显著 1 影响奶山羊肝脏营养代谢，H-NMR代谢组学可以较为全面地检测到肝脏组织的代谢物，准确地筛选出差异代谢物， 通过分析差异代谢物的代谢途径，阐明LPS引起肝脏代谢障碍的机理。 关键词：代谢组学；脂多糖；肝脏；代谢物；奶山羊 Study on the Effect of Lipopolysaccharide on Hepatic Metabolism in Dairy Goat Liver 1 1 2 1 1