人lamda3epsilon干扰素基因的克隆、表达及活性鉴定.pdf

人Lamda3和Epsilon十扰素基因的克隆、表达成活性鉴定 中文摘要 i l on干扰素基因的克隆、表达及活性鉴定 人Lamda3和Eps 中 文摘要 扰素的研究很少，因此我们通过RT-PCR获得这两个干扰素的余长 cDNA，并重组到真核表达载体，转染真核细胞，在真核系统中进行重组 表达并检测表达蛋白的生物学活性。 方法：分别从病毒或细胞因子刺激的细胞中抽提总RNA，通过RT-PCR 重组质粒pcDNA3．1 A—hlFN一九3和pcDNA3．1A—hlFN．￡分别导入真核 细胞COS．7或CHO细胞进行瞬时或稳定表达，研究表达产物的功能及 生物学活性。 全一致，真核重组表达质粒构建正确。结果显示hlFN-九3和hlFN—e基 抗病毒活性：rhlFN-e蛋白不仅具有抗病毒活性，还具有抗增殖活性， 其抗病毒分子机理可能与诱导细胞产生MxA抗病毒蛋白有关，为今后干 扰素的基因重组药物研制奠定了基础。 结论：我们成功的获得了hIFN．^3和hlFN．e基因，并在真核细胞中得 kLamda3和Epsilon干扰索基凼的克隆、表达及活性鉴定 中文摘要 到表达，其表达产物具有抗病毒和／或抗增殖活性。为进一步研究它们的 抗病毒、抗肿瘤或免疫调节机制奠定了实验基础。 关键词：hlFN．入3；hlFN．￡；真核表达；抗病毒；抗增殖；MxA蛋白 作 者：马丽丽 指导老师：杨吉成 lI 九1．amda3和Epsilon干扰索基因的克隆、表达及活性鉴定 英文摘要 and Detectionof Cloning，EukaryoticExpression Biological ofHumanInterferon一入3andHumanInterferon一￡ Activity Abstract interferon lamda3(hIFN一凡3)and Objective：Human have beenidentified recently asnew of forboth typesinterferons．Study interferonshasnot two beenmuchSO wantto far．Thus，weobtain full—length cDNAsforbothinterferons RT-PCR thecDNAs by amplification，subclone into vectorandtransfect the constructs eukaryoticexpression resulting into mammalian