人血清肿瘤标志液相芯片检测试剂的研制.pdf

博士后研究]二作报告 人Im清肿痈标志物液相芯榆测试剂的研制 缩写词 CEA carcinoembryonic 癌胚抗原 antigen AFP alpha-fetoprotein 甲胎蛋白 Bsurface 乙肝表面抗原 HBsAg hepatitis antigen tPSA total 总前列腺特异性抗原 prostatespecificantigen NSE enolase 神经原特异性烯醇化酶 neuron—specific CLIA chemiluminescence 化学发光免疫测定 immunoassay TRFIA time—resolvedfluorescence 时间分辨荧光免疫测定 immunoassay 博士后研究工作报告 人血清肿瘤标志物液相芯片检测试剂自叮研制 人血清肿瘤标志物液相芯片检测试剂的研制 摘要 肿瘤标志物在肿瘤的临床诊断和治疗中占有重要地位，不仅可用于肿瘤普查、早 期诊断、辅助诊断，良恶性鉴别和临床分期，同时对监测疗效、判断预后、预测肿瘤 的复发和转移也具有重要价值。临床上常采用多种肿瘤标志物联合检测，应用多变量 分析的方法来提高肿瘤诊断的阳性率和特异性。目前常用的血清肿瘤标志物检测方法 间分辨荧光免疫测定(1rI江队)等，这些方法存在一个共同的局限性——每次仅能检 测一种肿瘤标志物，因此检测多项指标时不仅将增加被检测者的经济负担，也使检测 者耗费更多时间、精力和试剂。 液相芯片是基于美国Luminex公司xMAP(flexibleMulti-Analyte Profiling)技术 的新型生物芯片技术平台，它是在不同荧光编码的微球上进行抗原．抗体、酶．底物、配 体．受体的结合反应及核酸杂交反应，通过红、绿两束激光分别检测微球编码和报告荧 光信号来达到定性和定量的目的，一个反应孔内可以完成多达100种不同的生物学反 应，是一种新一代高通量分子诊断技术平台。与其它免疫分析方法相比，液相芯片技 术除了具有快速、灵敏、灵活、检测范围广等显著特点，其最突出优势还在于可以同 时对同一样本中多种不同的目的分子进行定性和定量分析。 鉴于临床上联合分析多种肿瘤标志物的必要性以及目前检测手段的局限性，我们 的研究目的是应用液相芯片技术开发出能够联合检测多种血清肿瘤标志物的新型免疫 诊断试剂。 我们选择了数种临床上常用的肿瘤标志物——癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、 (HBsAg)为待测物，根据双抗体夹心免疫分析原理研制了能同时定量测定其中3～4 检测试剂，评价了试剂的检测范围、最低检测限、精密度、正常参考值范围、稳定性、 灵敏度、特异度、准确度等，并与化学发光免疫分析法(CLIA)和时间分辨荧光免疫 分析法(1rIUIA)进行了临床血清标本检测结果的相关性比较。 结果显示： ng／ml、0．013～166．4ng／ml、 (1)、CEA+AFP+HBsAg：检测范围分别为O．016～400 0．26～1625 ng／ml：最低检测限分别为10．7