应用组织芯片和位杂交对口腔鳞癌中kai1表达的研究.pdfVIP

应用组织芯片和原位杂交对口腔鳞癌中KAll表达的研究 摘要 目的：口腔鳞状细胞癌(oral cell squamous 最常见的恶性肿瘤。口腔鳞癌侵袭、转移的生物学特性使其难以根治而成 为口腔肿瘤治疗的难题。因此，研究口腔鳞癌的转移机制，寻找有效的转 移预示因子，对口腔鳞癌转移的早期预测和选择最佳的治疗方案将具有重 要意义。有关转移的分子生物学机制虽然还不清楚，但一些转移相关基因 可能在转移调控机制中发挥了重要的作用。KAll基因是近期研究发现的一 种新的肿瘤转移抑制基因，对多种肿瘤的转移具有抑制作用，其蛋白产物 KAJl／CD82在高转移潜能的肿瘤细胞和／或已发生转移的肿瘤组织内表达 下调或不表达。因此，KAll基因的表达情况可作为预测恶性肿瘤转移潜能 及判断肿瘤患者预后的指标。但目前KAll基因与口腔鳞癌转移关系的研 究报导还相对少见，而且KAll基因在恶性肿瘤中异常表达具体受哪些因 子调控仍不清楚。组织芯片(tissue chips)是将数十个、数百个乃至上千 个小的组织片整齐地排列在载玻片而成的微缩组织切片，具有高通量、快 速和低消耗的特点。本实验通过构建组织芯片和结合原位杂交方法以探讨 口腔鳞癌中肿瘤转移抑制基因KAllmRNA的表达情况，旨在从分子水平 探讨肿瘤转移抑制基因KAll与口腔鳞癌发生发展的关系及其临床病理意 义，寻找口腔鳞癌新的基因标志物，为口腔鳞癌的诊断、治疗和预后判断 提供一定的依据；并探讨组织芯片技术在肿瘤研究中的价值。方法：本研 究应用组织芯片技术和原位杂交方法检测了KAll基因在132例口腔鳞癌 (包括96例无、36例有淋巴结转移的原发灶)、28例相应的淋巴结转移灶 及20例口腔黏膜白斑和15例癌旁正常口腔黏膜组织中的表达情况，并应 腔鳞癌患者的临床病理参数之间的关系。本实验制备的组织芯片包含了取 自195个不同口腔黏膜组织石蜡标本，每片均以规则的点阵方式排列直径 为1．2mm的圆形组织样本，组织学结构完整。结果：I．KAIImRNA阳性 表达定位于细胞质中，其在正常口腔黏膜、口腔黏膜白斑(伴中、重度不 典型性增生)、无淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶、有淋巴结转移的口腔鳞癌 膜一口腔黏膜癌前病变一口腔鳞癌一淋巴结转移癌，KAll基因的表达呈逐 渐减低趋势。KAll基因在无淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶组中的表达与正 转移组中KAll基因的表达明显减低，而其在淋巴结转移灶中的表达又比 相应的原发灶组的表达迸一步减低，经统计学分析均具有显著差异(X 达与患者的年龄、性别、病程、肿块的大小、癌组织的浸润深度、肿瘤的 基因在高．中分化鳞癌组与低分化鳞癌组中的表达差异有统计学意义(x 无脱片、扭曲和重叠现象。组织芯片蜡块中的组织芯排列整齐，无碎裂， 无移位。结论：1．从正常口腔粘膜一口腔黏膜癌前病变一口腔鳞癌，KAll 基因的表达逐渐减低，提示KAll基因表达下调可能与口腔鳞癌的发生相 关。2．KAll基因在有淋巴结转移的口腔鳞癌原发灶中的表达较无转移组明 显减低，而在相应的淋巴结转移灶中表达几乎缺失，提示KAll基因很可 能在口腔鳞癌转移进程中发挥重要的调控作用，其表达下调可能与口腔鳞 癌的转移密切相关。因此，检测口腔鳞癌中KAll基因的表达可为临床早 期预测肿瘤的转移及判断患者的预后提供良好的指标。3．KAll基因表达异 常可能与口腔鳞癌的组织学分级有关，并可能在口腔鳞癌细胞获得转移潜 能方面起重要作用。4．KAll基因在正常口腔黏膜组织中的阳性率高表达， 推测口腔黏膜可能是KAll基因较高表达的组织之一。5．组织芯片技术是 一种制作简单、技术可靠、低消耗、结果更具标准化、易推广的新技术。 关键词：转移抑制基因：KAll基因；口腔鳞癌；组织芯片／组织微阵 列；原位杂交；转移抑制 OfTheMetastasis GerreKAllInOral Expression Suppressor Situ CellCarcinomaTissueAndIn Squamous By Chip