2型糖尿病听力害机制与cx26、cx30关系的探讨性研究.pdfVIP

中文摘要 2型糖尿病听力损害机制与Cx26、Cx30关系的探讨性研究 摘 要 目的：糖尿病是一种由多种因素相互作用造成的以高血糖为主要特征 的慢性代谢性疾病。随着社会经济的发展和人口老龄化，其患病率逐年增 高，其中，糖尿病确诊病例中有90％为2型糖尿病，其慢性并发症严重影 们广泛的关注，并进行了大量的研究。目前国内外学者主要从血管病变、 神经病变、代谢异常、遗传基因学等方面对糖尿病听力损伤的发病机制进 行研究，多数报道认为由毛细胞损伤最终导致听力损害，但导致毛细胞损 Junction 伤的具体机制仍没有明确。近年来的研究发现缝隙连接通道(Gap 内淋巴液中的高K+浓度和内淋巴液稳态，从而实现耳蜗的声音信号传导 临床上由两者突变造成的听力损失表现为进行性高频下降，这与糖尿病听 力损伤的临床表现相似；生理学上由两者突变造成听力损失的机制可能为 两者构成的缝隙连接通道功能出现异常，从而影响内淋巴液中K+浓度和 内淋巴液稳态，进而使毛细胞变性，从而导致听觉传导异常。Cx26和Cx30 在2型糖尿病大鼠耳蜗中表达情况如何以及与听力变化是否有关，目前国 内外还没有相关研究。 本实验在建立2型糖尿病大鼠模型的基础上，，通过测定糖尿病大鼠早 期的听力学改变，采用耳蜗切片HE染色、免疫荧光组织化学染色观察在 作用 方法：选用健康、清洁级雄性Wistar大鼠60只，无噪音接触史，耳 廓反应灵敏，体重180士209。适应性喂养1周后将其随机分为对照组20 只、实验组40只。对照组喂食常规饲料、实验组喂食高糖高脂饲料8周 后两组动物全部禁食不禁水12小时，对照组大鼠按30mg／Kg腹腔注射柠 中文摘要 blood STZ)。于第9周末取大鼠尾静脉全血测空腹血糖(FaSfingglucose， 常组、实验组造模前的体重，以及成模后第4周、8周、12周、16周、 20周的体重、空腹血糖和尿糖；观察各组大鼠活动、摄食、尿量、尿味、 全身毛发，耳廓反应的变化。两组大鼠在造模前及造模成功后第4周、8 brainstem 周、12周、16周、20周分别接受听觉脑干反应(auditoUresponse， ABR)测试。对照组和实验组大鼠在成模后第4周、8周、12周、16周、 20周分别分批在全麻下进行全身灌注、断头、取出耳蜗、固定、脱钙， 制作耳蜗石蜡切片进行HE染色和免疫荧光组织化学染色观察耳蜗形态变 化和Cx26、Cx30在耳蜗内表达变化。计量资料结果以均数士标准差(贮s) 表示，两样本均数比较采用t检验或秩和检验，以P0．05为存在显著性 差异作为判断标准。 结果： 1一般观察结果 实验组大鼠表现为多食、多饮、多尿、尿膻味明显，随病情发展，逐 渐出现全身毛失去光泽、脱毛、明显消瘦、活动减少、瘙痒等症状，耳廓 反应不灵敏。对照组大鼠外观表现为正常，毛发光泽，无消瘦；耳廓反应 灵敏。 2体重变化 造模前和造模后4周实验组和对照组大鼠体重无显著性差异 照组大鼠，两组比较有显著性差异(P0．01)。 3空腹血糖、尿糖变化 造模后4周、8周、12周、16周、20周实验组大鼠空腹血糖始终 为士。 4ABR各项指标变化 实验期间，两组动物ABRII波阈值比较没有统计学差异(PO．05)。 造模前实验组大鼠和对照组大鼠比较I波、III波、V波的潜伏期和I．III、 中文摘要 对照组大鼠比较I波、Ⅲ波、V波的潜伏期和I．Ⅲ、ⅡI．V、I．V波间期 大鼠和对照组大鼠比较III波、V波潜伏期和I．Ⅲ、I—V波间期有统计学 5耳蜗石蜡切片HE染色 实验组大鼠耳蜗组织血管纹中管腔样结构与对照组耳蜗组织血管纹 比较减少：实验组与对照组大鼠耳蜗螺旋韧带中和螺旋神经节细胞数量比 较有统计学差异(PO．05)，实验组大鼠耳蜗螺旋韧带中和螺旋神经节细 胞数量少于对照组。 6耳蜗中Cx26、Cx30表达变化