荧光偏振法研究脉冲电场对酿酒酵母细胞膜流动性影响.pdfVIP

第 2 8 卷 , 第 1 期 　 　　　　　　　　　　　光 谱 学 与 光 谱 分 析 Vol 28 ,No 1 ,pp 156160 2 0 0 8 年 1 月 　　　　　　　　　　　 　Sp ect ro scop y and Sp ect ral Analy si s J anuary , 2008 　 荧光偏振法研究脉冲电场对酿酒酵母细胞膜流动性影响 张 　鹰 , 曾新安 , 温其标 , 李 　琳 华南理工大学轻工与食品学院 , 广东 广州 　5 10640 ( ) ( 摘 　要 　以D P H 1 ,6二苯基1 ,3 ,5 - 己三烯 为荧光探剂 , 采用荧光偏振法探讨了脉冲电场 0 ～25 kV · - 1 ) - 1 cm , 0～266 m s 对酿酒酵母细胞膜流动性影响 。经 5 kV ·cm 电场处理后 , 酿酒酵母细胞膜的流动性显 著减小 , 并且随电场强度和处理时间的增加而减小 ; 通过平板计数法和紫外分光光度计法分别检测了脉冲 电场对酿酒酵母细胞存活对数及膜通透性影响 。结果显示 , 5 kV ·cm - 1 虽然只能使少量的酵母致死 , 却能 使酵母细胞膜的通透性显著增加 , 膜流动性显著降低 。并且细胞的存活率随电场强度增大而减小 , 细胞膜的 通透性随电场强度增大而增大 。这表明细胞膜的流动性降低与细胞膜的通透性升高成正相关 , 与细胞的存 活率成负相关 。由此推测脉冲电场在对酿酒酵母灭菌过程中 , 细胞膜是其作用的一个关键位点 , 膜流动性减 小 , 细胞膜通透性增强 , 是细胞死亡的主要原因。 关键词 　荧光偏振法 ; 脉冲电场 ; 细胞膜流动性 中图分类号 : Q64 　　文献标识码 : A 　　　文章编号 : (2008) 0 10 15605 引　言 1 　材料与方法 　　细胞膜是细胞生命活动的必需组织 , 其结构非常复杂 , 11 　实验材料 主要是由脂质和蛋 白质两类物质组成的复杂超分子动态系 酿酒酵母 CICC1308 菌种 , 华南理工大学微生物教研室 统 。1972 年由 Singer 和 Nicol son 提出的液态镶嵌模型认为 提供 ; 麦芽汁琼脂培养基 , 麦芽汁培养基为市购 ; 磷酸盐缓 ( ) ( ) 细胞膜是一种可以流动的嵌有蛋白质的脂类双分子层结构 。 冲溶液 PB S 70 , D P H Fluca 公司 , 先用四氢呋喃配成 2 膜流动性作为膜的一种生物物理学特性 , 与生物体的生命活 ×10 - 3 moL ·L - 1 母液 , 闭光 4 ℃保存 , 使用时用 PB S 稀释 动密切相关[ 1] 。目前物理及化学条件对膜流动性的影响研究 - 6 - 1 ( )