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苯甲酸钠的急性毒性试验 食品质量与安全111：王文静 学号：2302110120 摘要：苯甲酸钠的急性毒性试验目的：根据实验动物小鼠的苯甲酸钠的致死剂量水平初步估计其对人类的可能毒害的危险性。为了对苯甲酸钠毒性性质的进一步了解，找出其剂量—反应和剂量—效应的关系。方法：经查阅资料得小鼠的LD50值为2512mg/kg，通过霍恩式法设计出剂量组。通过经口灌胃方式染毒，观察小鼠中毒症状。结论：苯甲酸钠毒性为3级，属于低毒物质。中毒症状出现的时间与灌胃剂量存在直接线性关系：剂量越大，死亡就越快，死亡率就越高.。 关键字：苯甲酸钠 急性毒性 LD50值 灌胃染毒 1.引言 1.1苯甲酸钠性质:苯甲酸钠是酸性防腐剂，一般用在酸性条件下，在酸性条件下能转化为有活性的苯甲酸，因此防腐的机理同苯甲酸。其防腐功能在pH为2.5－4.0时最佳。在碱性介质中则无杀菌和抑菌作用。由于苯甲酸钠的水溶性远大于苯甲酸，在水介体系中更容易溶解和分散，而且在空气中稳定，因此比苯甲酸常用得多。苯甲酸钠亲油性较大，易穿透细胞膜进入细胞体内，干扰细胞膜的通透性，抑制细胞膜对氨基酸的吸收；进入细胞体内电离酸化细胞内的碱储，并抑制细胞的呼吸酶系的活性，阻止乙酰辅酶A缩合反应，从而起到食品防腐的目的。 1.2 苯甲酸钠的作用及限量：苯甲酸钠是很常用的食品防腐剂，有防止变质发酸、延长保质期的效果。在饮料、罐头、果汁、冷食、酱油、醋等食品领域有着广泛应用，也可作为饮料的防腐剂。苯甲酸钠低毒。近年来对其毒性的顾虑使得它的应用受限，对它的使用作出限制。应用在食品中的限量为0.1%，不允许用于食用肉类和维生素B1中。可参见苯甲酸。苯甲酸钠的ADI值0—5mg/kg（即每人每天每千克体重可允许摄入0－5毫克），相当于60kg成人的终身摄入无毒作用剂量是每天300mg；中国规定苯甲酸钠在饮料中的最大使用量为0．2g/kg，即一个成年人每天喝一升饮料，苯甲酸钠为200mg，比国际规定的 ADI值还低。 1.3 急性毒性试验设计：本研究采用小鼠经口染毒，急性毒性试验主要测定半数致死量，观察中毒表现，确定毒作用方式，为亚急性和慢性试验的观察指标及剂量分组提供参考依据。本试验采用灌胃染毒是将配成一定浓度梯度的溶液，装入灌胃针，注入受试小鼠的胃内。实验所选小鼠体重差别不大，所以受试小鼠一次灌胃体积在0.4ml/只。急性毒性中毒重点观察症状如下： 器官系统 观察及检验项目 中毒后反应 中枢神经系统功能及躯体运动 行为与动作 对刺激反应 肌肉张力 体位、叫声、活动异常，不安或卧倒。振颤、运动失调、麻痹、惊觉， 易兴奋，感觉迟钝或过敏。 松弛或紧张 自主神经系统 瞳孔 腺体分泌 放大或缩小 垂涎，流泪，出汗 呼吸系统 鼻 呼吸表现 鼻孔溢出液体 呼吸徐缓或过速，困难或衰竭 2.?材料与方法? 2.1?实验材料：小白鼠16只(室温，自由饮水摄食)，鼠笼，鼠粮。 2.2仪器与试剂? ??? 仪器：灌胃针，酒精棉，100ml容量瓶若干，烧杯,分析天平。? 试剂：苯甲酸钠150mg/ml，蒸馏水。? 2.3实验动物处理 取16只小鼠，随机分成A、B、C、D四组，每组四只小鼠。分别称取每只小鼠重量，记录并做标记，分别为头部，前腿，腹部，后腿。将试验小鼠将分组后的小鼠置于同一笼中喂养，禁食一夜,饮水正常。? 2.4实验设四个剂量组浓度 将查阅相关资料得到的苯甲酸钠LD50值安排在在第二组与第三组之间，根据霍恩式法计算出各小组浓度如下：? 1.00*103mg/kg、2.15*103mg/kg、4.64*103mg/kg、10.00*103mg/kg?，且每个剂量组浓度组距为2.15倍。禁食一夜后对小鼠进行灌胃操作。 各组小鼠灌胃水平 组别 A B C D 灌胃水平 1.00*103mg/kg 2.15*103mg/kg 4.64*103mg/kg 10.00*103mg/kg 小鼠灌胃死亡前后体重变化 体重/g 组别 标记部位 A A’ B B’ C C’ D D’ 头部 25.2 22.3 29.1 28.3 23.207 前腿 26.7 21.7 26.3 24.19 28.0 22.56 腹部 22.1 20.8 27.5 25.26 26.8 24.55 后退 28.3 20.7 25.9 23.48 29.7 27.81 ?按上表对小鼠进行分次灌胃，灌胃前用酒精棉对灌胃针进行消毒。灌胃结束之后2-3h可以进行喂食。灌胃完成后，观察小鼠是否有反常症状以及死亡情况并记录。?? 2.5观察指标 观察小鼠的异常症状及死亡数 ?急性毒性重点观察的中毒症