苜蓿膜联蛋白MtAnn3 基因的鉴定及其在根毛发育中的功能.pdfVIP

苜蓿膜联蛋白MtAnn3 基因的鉴定及其在根毛发育中的功能.pdf

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苜蓿膜联蛋白MtAnn3 基因的鉴定及其在根毛发育中的功能.pdf

2012 年 第 57 卷 第 6 期:431 ~ 437 《中国科学》杂志社 论 文 SCIENCE CHINA PRESS 苜蓿膜联蛋白MtAnn3 基因的鉴定及其在根毛 发育中的功能 ①† ②† ② ① ① ②* 巩子英 , 宋雪 , 陈功友 , 朱家璧 , 俞冠翘 , 邹华松 ① 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所, 上海 200032; ② 上海交通大学农业与生物学院, 上海200240 † 同等贡献 * 联系人, E-mail: hszou@ 2011-08-08 收稿, 2011-10-08 接受 国家自然科学基金和上海市自然科学基金(05ZR14135)资助 摘要 通过5′ RACE 扩增了苜蓿膜联蛋白MtAnn3 基因cDNA 的5′末端序列. 典型的膜联蛋白由 关键词 一个N 端结构域和一个C 端保守的核心结构域组成, 核心结构域一般含有4 或8 个由70 个氨基 苜蓿 酸组成的重复单元, 而MtAnn3 蛋白的核心结构域仅有1 个重复单元. 在洋葱表皮细胞中瞬时表 MtAnn3 膜联蛋白 达MtAnn3 蛋白, 揭示其具有细胞膜结合的特性. 借助农杆菌介导的苜蓿转化实验表明, 过表达 根毛变形 MtAnn3 的根部在不含 Ca2+ 的培养基上生长, 改变了根毛的极性, 根毛顶端膨大变形, 有时出现 分叉现象. 在农杆菌介导的MtAnn3 启动子-GUS 实验中, 外源植物细胞分裂素可以诱导MtAnn3 启动子的增强表达; 接种苜蓿中华根瘤菌进行结瘤实验, 启动子在根瘤原基和幼嫩根瘤中有较 强的活性, 而在成熟根瘤中活性较低, 在衰老的根瘤中检测不到启动子活性. 虽然MtAnn3 在根 瘤中的表达具有一定的时序性, 它却不是瘤特异性的, 它在苜蓿的根、茎、叶中都有高水平的转 录表达. 植物根毛顶端的生长是一个极性发育过程, 并 合的特征[6]. 目前, 已经从苜蓿中发现了 2 个膜联蛋 2+ [1] 且受 Ca 影响 . 在根毛生长期间, 顶端细胞胞质内 白基因, 其中苜蓿MtAnn1 基因的转录受根瘤菌合成 Ca2+浓度是其余部位的 10 倍之多, 阻断 Ca2+运输通 的结瘤因子的诱导. 关于MtAnn1-GFP 融合蛋白研究 道则会导致根毛发育受阻[2]. 在共生互作中, 苜蓿 发现, 在结瘤早期, MtAnn1 位于细胞质内, 皮层细胞 (Medicago truncalula)植物感受来自根瘤菌的结瘤因 内的 MtAnn1 定位在细胞核的边缘[7]. 在结瘤早期, 子时, 根毛会出现瞬间的细胞膜去极化的现象[3]. 随 另一个膜联蛋白基因MtAnn2 在根瘤原基的表达水平 后, 细胞质的Ca2+浓度出现振荡. 植物经过一系列的 很高. 在成熟根瘤中, MtAnn2 仅在维管束中表达[8]. 生理反应过程, 包括根毛变形等, 最后形成一个新的 苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti) 的 nifA [4] 器官——根瘤 . 基因是固氮的正调节因子,

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