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Nephrin和CD2AP在阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生中作用的研究 Nephrin和CD2AP在阿霉素肾病大鼠蛋白尿 发生中作用的研究 中山大学附属第一医院儿科 专 业：儿科学 硕士研究生：彭亚琴 导 师：莫樱副教授 摘要 蛋白尿是肾脏疾病最常见的表现，也是肾脏疾病持续进展的重要危险因素。 肾小球滤过屏障结构或功能的异常是引起蛋白尿的病理基础。近年来发现足细胞 对于维持肾小球滤过屏障结构极为关键。 Nephrin和CD2AP均为新近发现的sD主要组成成份，在肾脏中分别定位于 SD和足突侧膜，两者的羧基端相互连接，共同维持SD的正常结构和功能。 现大量蛋白尿，最终死于肾功能衰竭，肾组织病理改变均为足细胞足突消失，提 示nephrin和CD2AP在蛋白尿发生中具有重要作用。 近年来，nephrin和CD2AP在蛋白尿发生机制中作用的研究逐渐增多，但结 果却不尽一致：对于经药物(如肾上腺糖皮质激素、血管紧张素转换酶抑制剂、 血管紧张素II受体拮抗剂)干预后nephrin和CD2AP的表达变化的研究鲜有报道。 本课题的研究目的是观察nephrin和CD2AP在阿霉素肾病大鼠肾小球中的表达 变化和意义以及泼尼松、依那普利、氯沙坦对nephrin和CD2AP表达的影响。 通过上述研究，进一步了解肾病综合征(NS)蛋白尿的发生机制，为NS临床治 疗提供理论依据。 Nephrin和CD2AP在阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生中作用的研究 材料和方法 1、实验动物 白定性实验阴性。 2、实验方法 (1)大鼠阿霉素(ADR)’肾病模型的制备及分组：SD大鼠60只随机分为 正常对照组l8只和模型组42只。实验初，正常对照组大鼠一次性尾静脉注射生 理盐水6ml／kg，模型组大鼠一次性尾静脉注射阿霉素6mg,／kg。2周末24h尿蛋 白定量30mg者为肾病模型成功，再随机将模型组大鼠分为。肾病未治疗组(18 只)、肾病对照组(6只)、泼尼松组(6只)、依那普利组(6只)和氯沙坦组(6 只)。正常对照组和肾病未治疗组大鼠分别于注射ADR后2剧、4周、6周末各 杀检6只，。肾病剥照组、泼尼松细、依那普利组及氯沙坦组每Et分别予蒸馏水 闹后杀检。 阿霉素肾病大鼠肾小球巾的表达和分布。 结果 1、24小时尿蛋白定量 注射ADR后第1周末，模型幻大鼠开始出现尿蛋白，2周末24小时尿蛋白 依那普利和氯沙坦治疗2周后尿蛋白量较肾病对照组无显著差异，治疗4周后24 mg／d，均较肾病对照组[(342 01)，三个治疗组间尿 67-+41．11)mg／d]lt)j显降低(p0 蛋白量差异无显著意义。 2、血生化检测结果 01)；胆固醇[(2．7±1 24 g／L]，差异有显著性(po 3)mmol／L]高Jj正常对照组【(1 Nephrin和CD2AP在阿霉素肾病大鼠蛋白尿发生中作用的研究 未见明显差异。经泼尼松、依那普利、氯沙坦治疗4周后血白蛋白分别为(24．94 均不同程度回升(p0．05)，胆固醇、尿素氮及肌酐无明显差异。 3、肾脏病理 正常对照组肾脏光镜和电镜均未见病变。肾病未治疗组大鼠6周时有少量腹 水，肾脏外观苍白、肿胀。光镜下肾病未治疗组2周时肾小球无明显病变，4周 时l肾小球系膜细胞轻中度增生，6周时系膜增生加重，部分有节段性硬化及毛细 血管腔有血栓，各治疗组肾小球系膜增生较肾病对照组减轻，未见硬化。电镜下 肾病未治疗组2周时足细胞足突变形、部分融合，4周时足突融合加重，6周时足 突弥漫性融合、部分断裂及消失，基底膜部分增厚，内皮细胞窗孔消失。各治疗 组足突病变较肾瘸对照组减轻。 4、免疫组织化学结果 正常对照组nephrin和CD2AP免疫组织化学染色显示为沿肾小球毛细血管 袢线样分布。肾病组肾小球nephrin和CD2AP分布异常，从沿毛细血管袢线样 分布逐渐转变为连续