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维甲酸诱导内耳代细胞分化的研究

2 万方数据 主要缩略词及中英文对照4 摘要5 1 内耳祖代细胞的培养 11 1.1 实验材料 11 1.2 CNPs 的培养和传代 12 1.3 神经干细胞的特异性标志物nestin 在内耳祖代细胞中的表达 13 1.4 实验结果 14 附图 15 2.1 实验材料 16 2.2 CNPs 细胞的诱导 17 2.3 诱导后CNPs 细胞Math1、Myosin7a 细胞免疫荧光检测 17 2.4 RT-PCR 检测诱导后细胞Math1、Myosin7a 的mRNA 表达情况 18 2.5 统计学分析20 2.6 实验结果20 3 在体外RA 对内耳祖代细胞细胞骨架F-actin 的影响26 3.1 实验材料26 3.2 细胞增殖——Brdu 实验27 3.3 RA 对内耳祖代细胞细胞骨架F-actin 的影响28 3.4 统计学分析29 3.5 实验结果29 Brdu 检测细胞增殖29 RA 对内耳祖代细胞细胞骨架F-actin 的影响29 附图30 讨论33 结论38 参考文献:39 综述:43 3 万方数据 主要缩略词及中英文对照 CNPs cochlear neural progenitor cells 内耳祖代细胞 EGF Epidermal Growth Factor 表皮生长因子 RA Retinoic Acid 维甲酸 bFGF basic Fibroblast Growth Factor 碱性成纤维细胞生长因子 SHH Sonic Hedgehog 音速刺猬 , DMEM Dulbecco s Modified Eagle Medium DMEM 培养基 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 PBS Phosphate Buffered Saline 磷酸盐缓冲液 DAB Diaminobenzidine 二氨基联苯胺 DAPI 4,6-diamidino-2-phenylindole 4,6-二脒基-2-苯基吲哚 4 万方数据 维甲酸诱导内耳祖代细胞分化的研究 摘要 目的:观察体外无血清培养基条件下维甲酸(RA)能否诱导内耳祖代细胞分 化为毛细胞。 2 方法:取冻存内耳祖代细胞(CNPs)解冻后在25cm 的培养板中用 DMEM/F12+N2+EGF+bFGF 无血清培养基条件下培养3 天,取生长状态良好的细胞 在倒置显微镜下观察细胞形

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