七氟烷预处理对体大鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响.pdf

七氟烷预处理对在体人鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响 中文摘要 中文摘要 目 的 1．通过对在体大鼠缺血再灌注心肌梗死面积的测定和心肌细胞凋亡的检测，观 察七氟烷预处理对缺血再灌注损伤的保护作用。 2．通过Western Blot法半定量分析七氟烷预处理前后心肌细胞内抗凋亡因子 Bcl．2及半胱天冬蛋白酶Caspase．3的蛋白表达变化，进一步探讨七氟烷预处理的保护 机制。 方法 实验一 min 雄性成年SD大鼠32只，建立在体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型，平衡30 后随机分为4组。假手术组(门=4)大鼠未行心肌缺血再灌注；缺血组(，z=12)大鼠 min 行心肌缺血30min再灌注2h；七氟烷组(刀=4)大鼠单纯吸入2．5％七氟烷30 min 但未行缺血再灌注；七氟烷缺血组(疗=12)大鼠吸入2．5％七氟烷30rain，继之15 药物排出后行心肌缺血30min再灌注2h。采用多通道生理记录仪连续监测并记录大 鼠血液动力学变化。缺血组和七氟烷缺血组(刀=8)大鼠心肌再灌注后即刻取左心室 心肌标本经氯化三苯四氮唑(TPT)染色法测定左心室心肌梗死范围。4组大鼠(疗 =4)再灌注后即刻或相应时间点取左心室心肌标本，采用TUNEL细胞凋亡检测试 剂盒检测细胞凋亡，显微镜下棕黄色为凋亡阳性细胞，计算细胞凋亡指数。 实验二 雄性成年SD大鼠32只，分组情况同实验一(刀=8)。分别于大鼠心肌缺血前即 刻、再灌注后即刻或相应时间点取左心室心肌标本。采用Westernblot法半定量分析 4组大鼠心肌中抗凋亡因子Bcl．2及半胱天冬蛋白酶Caspase．3的蛋白表达变化。 勿七 申 0日 木 实验一 血液动力学结果平衡期，4组心率(躲)、平均动脉压(MAP)和心率．收缩 压乘积(RPP)差异无统计学意义。与平衡期相比，七氟烷组及七氟烷缺血组在吸入 七氟烷预处理对在体人鼠缺血再灌注损伤心肌细胞凋亡的影响 中文摘要 在再灌注lh和2h时降低(P0．05)。 的心肌梗死面积减少。 TUNEL染色结果 与假手术组相比，缺血组[(19．164-3．11)％】、七氟烷缺血组 【(6．114-1．34)％】心肌细胞凋亡指数增高；与缺血组相比，七氟烷缺血组心肌细胞凋亡 指数降低(尸O．05)。 实验二 缺血前即刻或相应时间点左心室心肌标本Westernblot结果与假手术组比较， 七氟烷组、七氟烷缺血组Bcl．2蛋白表达上调(PO．05)。 再灌注后即刻或相应时间点左心室心肌标本Westernblot结果与假手术组比 较，缺血组Bcl。2蛋白表达下调，七氟烷组Bcl．2蛋白表达上调(尸0．05)；缺血组、 0．05)。 各组缺血前即刻或相应时间点与再灌注后即刻或相应时间点Westernblot比较结 果与缺血前即刻或相应时间点相比，缺血组、七氟烷缺血组再灌注后即刻Bcl．2蛋 白表达下调(P0．05)，假手术组、七氟烷组Bcl．2蛋白表达变化无统计学意义；缺 血组、七氟烷缺血组再灌注后即刻Caspase．3蛋白表达上调(尸0．05)，假手术组、 七氟烷组Caspase．3蛋白表达变化无统计学意义。 结论 七氟烷预处理通过上调缺血前Bcl．2蛋白的表达，减弱由缺血再灌注引起Bcl．2 蛋白表达的下调，降低了再灌注后Caspase-3蛋白表达的上调幅度，减轻心肌再灌注 损伤后的细胞凋亡，从而减少大鼠一tl,肌缺血再灌注损伤的心肌梗死范围，发挥其心肌 保护作用。 关键词：麻醉药，吸入；心肌再灌注损伤；细胞凋亡 作 者：刘 霞 指导教师：谢 红：王琛