内源性调节性t胞在蛛网膜下腔血后脑血管痉挛及脑损伤中的作用.pdf

泰山医学院硕士论文 内源性调节性T细胞在蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛及脑损 伤中的作用 研究生：张金卉 专业：神经病学 导师：孙保亮教授 中文摘要 研究目的 神经功能的影响。 2．探讨内源性调节性T细胞删除对蛛网膜下腔出血后早期脑损伤的影 响。 性T细胞删除对脑组织炎症的影响。 除对蛛网膜下腔出血后脑组织炎症的影响。 研究方法 以及PBS注射组中。用血管内穿刺法建立小鼠蛛网膜下腔出血模型，激光多 普勒血流仪记录顶叶皮层脑组织血流量的变化。假手术组不穿破血管。Tregs 冲液。术后处死小鼠后，快速取脑，并用照相机拍摄脑基底池部出血情况，根据 运动感觉进行评分，总分为18分。于蛛网膜下腔出血后72h，用干湿重比较 法检测脑组织含水率。用伊文思蓝法评价各组动物血脑屏障通透性。于术后 72h，取脑制成石蜡切片，行苏木素一伊红染色，于镜下观察各组小鼠基底动 脉管径大小以及管壁厚度的变化。制作脑切片后尼氏染色观察神经细胞变 万方数据 泰山医学院硕士论文 的表达及分布情况。用酶联免疫吸附法测定脑组织中IL一6、TNF．n含量。用 western blot检测皮层组织炎症因子IL6的含量。 研究结果 1．出血程度：假手术组无出血，假手术组无出血；蛛网膜下腔出血组、 PBS注射组、Tregs删除组在蛛网膜下腔均见到血液，各组之间出血量无统计 意义的差异。 2．神经功能评分：假手术组评分为18分，SAH组、PBS注射组与假手术 有统计学意义(尸O．05)，与SAH组的评分相比也有统计学意义(P0．05)。 3．血脑屏障通透性及脑水肿测定：小鼠SAH后血脑屏障通透性增加，脑 组织含水量加重：Tregs删除组与SAH组相比，血脑屏障通透性显著增加 (P0．05)，脑组织含水量显著加重(P0．05)。 4．基底动脉形态：小鼠蛛网膜下腔出血后基底动脉明显痉挛，Tregs删除 后痉挛更为显著(P0．05)。 5．尼氏染色：蛛网膜下腔出血后，小鼠皮层中尼氏小体的神经元数量明 显减少，Tregs删除后减少更为显著(PO．05)。 6．细胞凋亡检测：蛛网膜下腔出血后，小鼠皮层区凋亡细胞数增多，Tregs 删除后与SAH后相比，有显著统计学以及意义(P0．05) 7．免疫荧光法测定皮层区IL．6、GFAP SAH组、PBS注射组、Treg细胞删 除组皮层区表达量均增多，Tregs删除组增多更为显著(P0．05)。 TNF一Ⅱ表达量均有所升高，Tregs删除组与之相比更显著(P0．05) 9．Western (P0．05)。 研究结论 1．本研究成功构建了蛛网膜下腔出血小鼠模型以及Tregs删除小鼠模型， 并发现Tregs删除后会加重脑血管痉挛、脑组织水肿、血脑屏障通透性、凋亡 等，同时也加重脑组织的炎性损伤。 2．，J、鼠SAH后产生神经功能有所损害，Tregs删除后可加重小鼠运动、感 2 万方数据 泰山医学院硕士论文 觉功能的损伤。 关键词：内源性调节性T细胞；蛛网膜下腔出衄；脑血管痉挛；脑损伤 3 万方数据 泰山医学院硕士论文 TCELLSIN RoLEoFENDoGENoUSREGULAToRY VASoSPASMAFTER CEREBRAL HEMoRRHAGEANDBRAININJURY