准分子激光术后膜神经损伤与修复研究.pdf

准分子激光术后角膜神经损伤与修复研究 摘要 第一部分lJASIK与epi—IJASIK术后角膜神经损伤与修复实验研究 insitu 目的探讨准分子激光原位角膜磨镶术(1aser keratomileusiS， insitu laser LASIK)与机械法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(epipolis 康新西兰白兔20只，其中2只做为正常对照，其余18只做为实验组。实验组 白兔，随机选择一眼行LASIK，另一眼行epi—LASIK。两种手术的激光切削方案 相同：光学区直径6mm，切削深度81pm(一5．ODs)。分别在术后i天、3天、7 天、1月、3月、6月，取3只兔子的角膜行氯化金染色，观察角膜神经形态。 测量仪测量中央角膜知觉。结果Epi—LASIK术后，切削区内浅层角膜神经消 失，深层基质神经保留。LASIK术后，除蒂部以外，角膜瓣内角膜神经均消失， 切削区内深层基质神经也大部分消失。Epi—LASIK术后l天，出现少量再生神 经纤维；术后3天、7天，出现大量再生神经纤维，并形成上皮下神经丛及上 皮间神经末梢。LASIK术后3天，角膜瓣边缘出现少量再生神经纤维，中止于 瓣基质中；术后7天，角膜瓣边缘再生神经纤维稍增多，但仍中止于瓣基质中， 未见上皮下神经丛及上皮间神经末梢形成。Epi—LASIK术后，切削区中央上皮 问神经末梢恢复至正常需1～3个月，LASIK术后需6个月。Epi—LASIK术后， 切削区内前基质神经丛形成速度较快，但早期形态异常，术后6月时，前基质 神经丛形态接近正常。LASIK术后，角膜瓣内前基质神经丛形成速度较慢，但 形态更接近正常，术后6月时前基质神经丛基本恢复。LASIK术后角膜知觉下 降严重，甚至消失，恢复至正常需6个月。Epi—LASIK术后角膜知觉下降程度 轻，恢复至正常需3个月。术后各时间点，除6月以外，LASIK组角膜知觉均 PO．01)。结论形态学与功能学的变化均提示，LASIK对角膜神经的损伤程度 较epi—LASIK更重，角膜神经修复速度也更慢。 第二部分I且SIK与epi—LASIK术后角膜中神经生长因子变化实验研究 目的探讨LASIK与epi—LASIK术后兔角膜中神经生长因子(nervegrowth factor，NGF)变化。方法健康新西兰白兔28只，其中4只做为正常对照， 其余24只做为实验组。实验组白兔，随机选择一眼行LASIK，另一眼行 epi—LASIK。两种手术的激光切削方案相同：光学区直径6mm，切削深度81“m (一5．ODs)。分别在术后1天、3天、7天、1月，取角膜中央6rnm区域，用于 NGF免疫组化染色、Westernblot检测NGF蛋白表达、RT—PCR半定量法检测角 膜上皮与基质NGFmRNA表达。结果正常兔角膜中，NGF免疫阳性染色弱。 Epi—LASIK术后l天，角膜上皮层NGF免疫阳性染色明显增多；术后3天，角 膜上皮完全愈合，NGF免疫阳性染色仍较正常时稍多；术后7天、1月，角膜中 NGF免疫阳性染色弱，与正常角膜接近。LASIK术后各时间点，角膜NGF免疫阳 blot结果示，Epi—LASIK术后各时间点， 性染色弱，与正常角膜接近。Western 蛋白表达较正常对照少，差异有统计学意义(t一12．52，一9．95：P=O．001)；术 后7天、1月，角膜NGF蛋白表达与正常对照接近(P)O．05)。两种手术之间比 后l天、3天，角膜上皮NGFmRNA表达较正常对照多，1天时最明显，差异有统 NGFmRNA表达与正常对照接近(P)O．05)。两种手术之间比较，术后1天、3天， 基质NGFmRNA表达与正常接近(P)O．05)。两种手术之间比较，术后1天， 可能与角膜神经再生以及角膜知觉的维持有关。LASIK术后早期角膜中NGF蛋 白表达下降，可能是角膜神经大范围受损所致，与术后早期角膜知觉严重下降 以及角膜神经修复缓慢可能有关。 第三部分LASIK和LASEK术后角膜知觉恢复临床研究 目的 比较LASIK和乙醇法准分子