水通道蛋白在人膜上的表达及调控的探讨.pdf

盔垂遒垂宦蕉厶险照土笪垂姿壁遇控丝堡过 主塞熊垂 水通道蛋白在人胎膜上的表达及调控的探讨 专 业：妇产科学 博士研究生：张睿 导 师：杨冬梓教授 中山大学附属第二医院妇产科，广州510120 中文摘要 白，它们以较高的渗透系数(permeability 化能(activation energy，Ea6kcal)介导大量水分子快速地顺渗透压梯度跨 生物膜转运u～。自从1988年Agre等第一次从人红细胞膜中分离出水通道蛋白1 (Aquaporin 广泛分布于机体组织细胞，促进细胞膜水通透性的增加，参与水的分泌、吸收和 细胞内外水的平衡调节，涉及大多数与水代谢有关的脏器的生理和病理，尤其是 肾、脑、消化道、腹膜、眼、腺体等。 正常的羊水量是胎儿生长、发育和活动所必需的。羊水循环涉及大量的水进 出羊膜腔。近年来，大量研究表明膜内途径(intramembranous pathway，IM)， 即羊水通过胎盘胎儿面的羊膜、绒毛膜转运到胎儿血循环，是调节羊水平衡的根 本因素之一嘲，但其细胞和分子机制至今未完全阐明。以往体外研究显示羊水通 过羊膜、绒毛膜的渗透水通透系数Pf远远大于羊水简单扩散通过细胞膜的扩散通 透性系数Pd珏目。有人推测胎膜、胎盘中存在着广泛的、非特异性的、选择性吸收 水的通道，这种通道很可能就是AQPs。 羊水调节失衡可导致羊水过多或过少，使胎儿、新生儿发病率、死亡率显著 增加。除了母儿因素外，临床上约有3096～50％羊水量异常未能找到确切的病因， 称为特发性羊水异常b卫，无法对其进行针对性治疗，一直是围产医学的难点之一。 因此了解AQPs在人胎膜中是否表达，表达规律如何，有哪些因素影响其表达， 盔垣道垂旦查厶胎堕上的蠢姿丛逦控鲤拯过 主童擅要 AQPs是否与羊水量改变有关，可为进一步研究羊水膜内吸收和羊水量调控的机 制，探索特发性羊水异常的病理生理，寻找治疗羊水过多或过少的有效方法提供 参考。 近几年人们开始研究AQPs与羊水循环的关系，发现人和其它哺乳动物的胎盘 和胎膜中有水通道蛋白家族成员的表达，主要为AQP一1、3、8、9亚型唾删。但是 这些研究对于哪种AQP亚型表达在胎膜上及其分布情况的结果不完全一致，也未 进行AQP亚型之间的对比分析。国内外对于AQPs与羊水异常的关系和胎盘、胎膜 AQPs表达调控的报道不足十篇，而且多数是在动物体的研究，可能存在着种属的 局限性。 性激素调控下的生殖过程很多方面涉及到液体的改变，如卵泡和胚泡的发育、 精予的发生、精液的形成以及子宫内膜、子宫腔液、输卵管液的周期性变化等。 研究证实，表达于雄性和雌性生殖道参与生殖过程液体转运的一些AQP在性激素 的影响下可发生表达和分布的变化吐翻。妊娠期胎盘分泌大量的雌、孕激素，调 节胎盘、胎膜功能和妊娠进展。曾有报道在动物研究中发现胎膜对孕酮、雌激素 等一些激素的反应性可以影响胎儿液的组成和量㈣。胎盘分泌的雌孕激素是否对 人胎膜上的AQPs有影响而参与羊水调节值得探讨，目前国内外尚未见报道。 本研究通过检测AQP—I、3、8、9mRNA和AQPl、AQP9蛋白在人胎膜各部分的 表达，并比较其在羊水正常、特发性羊水过多、特发性羊水过少三组中的差别， 探讨水通道蛋白在人胎膜中的表达规律和分布特征及其与羊水量异常之间的关 Institute 系，并通过体外刺激实验研究雌孕激素对人羊膜上皮WISH细胞(Wistar Susan Hayflickcell)AQP-I、3、8、9表达的影响，探讨雌、孕激素对人羊膜 AQPs是否存在调节作用。 第一章水通道蛋白在正常人足月妊娠胎膜中的表达 1．目的 确定水通道蛋白家族成员AQP．1、3、8、9在人正常足月妊娠羊膜、绒毛膜上 的表达及分布规律