普乐可复（fk06）缓释膜应用于同种异体神经移植的实验研究.pdf

中文 摘 要 普乐可复(FK506)缓释膜应用于同种异体神经移植的 实验研究 摘 要 目的:长期以来，周围神经损伤的修复对于临床医务工 作者都是一个难题。临床上，周围神经长段缺损行自体神经 移植是首选方法，但是自体神经来源有限，并给供区造成一 定的功能障碍，况且，神经生长速度为1mm/d，也是需要迫 切解决的问题。国内外学者为了解决这两个问题进行了诸多 研究。近年来许多学者的研究重点聚于同种异体神经移植， 异体神经来源广、容易获得，有着广阔的临床应用前景。同 种异体神经移植成功与否，主要取决于如何减轻神经移植体 与宿主之间的免疫排斥反应。对同种异体神经预处理降低其 抗原性的方法有化学法、冷冻法、干燥法、照射法等，都能 降低其抗原性，还有应用免疫抑制剂、皮质激素，或同时应 用都取得较好效果。周围神经损伤后其再生速度为1mm/d, 是影响功能恢复的主要因素。肌肉长时间失神经支配后，肌 纤维出现萎缩、变性和纤维化，彻底丧失功能恢复的可能。 因此加速神经再生的速度，由现在的1mm/d提高到2-3mm/d, 一直是基础和临床周围神经研究工作者的目标。新型免疫抑 制剂FK506是从链霉菌属中分离出来的大环内醋类抗生素， 英文名tacrolimus，常译为他克莫司或他克雷姆，商品名为 普乐可复，FK506为实验室命名。它的主要作用有 (1)抑 制器官移植排斥反应的作用， (2)促神经再生作用。临床 上异体手移植发现，应用 FK506可加速神经再生速度达 1 中 文 摘 要 3mm/d。临床常用静脉制剂为每支5mg,IOmg/ml，经生理 盐水或葡萄糖液混合后静脉滴注。口服制剂有 lmg和5mg 两种。主要副作用发生在静脉给药时，常见的有头痛、恶心、 呕吐及中枢神经系统症状震颤、失眠;少数病人还有灼热感、 低镁血症，另外，FK506用药期间对血糖影响较大。如何减 少全身用药所带来的毒副作用，并有效地作用于神经移植 段，减轻排斥反应，同时促进其生长成为研究的重点。故本 实验拟在异体神经移植局部应用FK506缓释膜，旨在探索发 现 (1)同种异体神经移植局部应用FK506缓释膜的神经再 生是否优于新鲜的异体神经移植。 (2)同种异体神经移植 局部应用 FK506缓释膜的神经再生是否优于单纯冷藏同种 异体神经移植再生。(3)同种异体神经移植局部应用FK506 缓释膜的神经再生与新鲜的自体神经修复有无明显差异。 方法:取60只雌性SD大鼠做为受体，体重150-200g 按手术先后随机分为4组，每组 15只，A组:新鲜同种异 体神经移植组，B组:冷藏保存同种异体神经移植组，C组: 冷藏保存同种异体神经移植组同时应用FK506缓释膜，D组: 新鲜自体神经移植组。另取24只Wistar大鼠，取其双侧坐 骨神经共48根作为供体，其中15根用生理盐水浸泡30分 钟直接移植于A组，其余33根依次浸泡于50%,70%、和 85%甘油溶液中，每次3小时，然后分装盛有85%甘油溶液 的无菌密闭瓶中，置于50C条件下保存 1周，移植前用生 理盐水浸泡30分钟，分别移植于B,C、组。各组均用11-0 无创缝合线缝合神经外膜，将神经移植物与神经断端作端端 吻合，术中将己制备好的FK506缓释膜放在C组神经移植 的位置，喂养条件、室温及管理条件完全一致。术后分别于 2 中 文 摘 要 4,8,12周对移植物行大体和光镜观察及轴突图像分析、小 腿三头肌湿重比较、患肢坐骨神经电生理检查，移植神经电 镜检查，免疫组织化学染色 (抗鼠S-100蛋白)。对肌电图 结果 (传导速度)、小腿三头肌肌湿重、有髓神经轴突再生 恢复率的原始数据采用SAS统计软件进行单因素方差分析， p0.05提示有统计学意义。 结果:术后4,8,12周时，通过对各组大体观察结果、 显微解剖观察、光镜观察结果、电镜观察结果、电生理检测 结果、小腿三头肌肌湿重、有髓神经轴突再生恢复率结果的 分析，4组中C,D组神经生长最好，B组次之，A组最差。 经过对肌电图