胰腺癌细胞mi paca-2趋化因子表达与ccl25ccr9促细胞增殖侵袭的相关研究.pdf

胰腺癌细胞MI A 增殖侵袭的相关研究 摘要 研究背景： 胰腺癌是恶性度极高的恶性肿瘤之一，患者发现时多属晚期，仅有10％-15％ 有手术切除的机会，5％-7．5％能根治。但是它术后复发率高，预后差，5年生存率 仅为5％左右。胰腺癌的治疗面临如下难题：患者发现晚，手术切除几率小；病情 发展快，易于出现局部浸润及远处转移；对放化疗均不敏感。趋化因子是一类促 炎多肽细胞因子的超家族，是能使细胞发生趋化运动的小分子细胞因子。近年来， 有研究证实趋化因子能促进肿瘤细胞增殖、侵袭、迁移。但具体哪些趋化因子在 胰腺癌发展过程中发挥作用尚不得知。 研究目的： (1)使用cDNA基因芯片筛选出与胰腺癌细胞MIAPaCa-2侵袭转移相关的 的趋化因子及受体。 (2)采用单克隆抗体阻断趋化因子及其受体的相互作用，观察胰腺癌细胞 的侵袭转移能力的变化，在此基础上明确阻断趋化因子及其受体相互作用应用于 临床防治胰腺癌的可行性。 研究方法： 建立裸鼠的原位胰腺癌模型，将早期与晚期的肿瘤行趋化因子及受体的cDNA 芯片检测，筛选出在胰腺癌病情发展中发挥作用的趋化因子及其受体；再通过免 PCR，WesternBlot等方法进行验证；另一方面， 疫组化，RT—PCR，real-time 通过MTT实验，流式细胞仪检测细胞周期变化来验证此趋化因子对胰腺癌细胞的 促增殖作用，通过transwell实验来验证此趋化因子对胰腺癌细胞的趋化、促侵 袭、促迁移作用，并运用此趋化因子受体的单克隆抗体阻断趋化因子与受体之间 的相互作用后，再观察其对胰腺癌细胞上述作用的变化。 研究结果： (1)建成裸鼠原位胰腺癌模型。 (2)通过cDNA基因芯片筛选出晚期胰腺癌高表达的趋化因子及其受体 PCR，Western Blot等方法均 CCL25／CCR9，运用免疫组化，RT-PCR，real-time 证实其在晚期肿瘤标本中表达明显增强。 (3)证实CCL25对胰腺癌细胞有促增殖，促侵袭，促迁移作用。采用 anti—CCR9阻断后，此种作用明显减弱。 结论： 晚期MIA 增殖，侵袭及迁移，阻断CCL25与CCR9之间的作用可以抑制其增殖，侵袭及迁移。 关键词 CCR9 胰腺癌MIAPaCa-2趋化因子受体CCL25 function Chemkines inMIAPaCa—‘2andthe expressed ceII|．Re tothis ofCCL25／CCR9 Abstract has isoneofthemost verypoor Pancreaticcancer malignanttumors，which chancetoreceive 10％一15％ofthe have operation， prognosis．Only patients 5％一7．5％havechanceto resection．Evenafterresection， complete