重组腺相关病毒经肽y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠癫痫发作及其海马组织中tau蛋白表达的影响.pdfVIP

目 录 中文摘要…………………………………………………………………1 英文摘要…………………………………………………………………．4 研究论文重组腺相关病毒神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠 癫痫发作及其海马组织中Tau蛋白表达的影响 —▲￡．—j一 日U舌………………………………………………………………………………………·7 材料与方法…………………………………………………………一9 结果…………………………………………………………………17 附图…………………………………………………………………19 附表…………………………………………………………………22 讨论………………………………………………………………………………………．24 结论…………………………………………………………………27 参考文献……………………………………………………………28 l 综述Tau蛋白过度磷酸化在癫痫发病机制中的作用…………………3 致谢………………………………………………………………………………………38 个人简历…………………………………………………………………40 中文摘要 重组腺相关病毒载体神经肽Y基因转染对红藻氨酸致痫大鼠 癫痫发作及其海马组织中Tau蛋白表达的影响 摘 要 癫痫(epilepsy)是慢性脑部神经系统疾病，其特征为因脑内一群神经元 过度的同步并持续的放电所致的反复性一过性痫样发作(seizure)。癫痫 因其难治性及反复发作性，对人们的生活带来极大困扰。颞叶癫痫仍然是 其中最常见的药物难治性神经系统疾病。大量研究表明，遗传因素在癫痫 的发病机理中占有重要的地位，难治性癫痫亦与多种耐药基因有关，因此 癫痫的基因研究是当前国内外癫痫研究的热点。 当前国外有关癫痫治疗的研究集中在应用抗癫痫药物治疗，迷走神经 刺激和外科手术治疗，虽然从治疗的方法和治疗的效果，较前已取得了一 定的进步，但仍有相当一部分难治性癫痫发作不能得到有效控制的现实让 国内外专家期待和寻求一种更新的解决办法。基因治疗有希望成为药物难 治性癫痫患者的替代治疗。 基因治疗是20世纪80年代以后发展起来的一种新的疾病治疗方式， 它通过载体将正常基因或有治疗作用的基因导入靶细胞，纠正基因缺陷或 合成目的蛋白，从而达到治疗疾病的效果。在用于人类基因治疗的常用病 adeno—associated 毒载体中，重组腺相关病毒(Recombinant virus，rAAV) 载体因其无潜在致病威胁，同时能稳定地表达外源基因，宿主范围广，转 染率高等优点，得到广泛应用。 NPY，即神经肽酪氨酸，是由36个氨基酸组成的一种肽类物质，广 泛分布于中枢神经系统及周围神经系统，在中枢神经系统中以海马内浓度 最高，具有抗惊厥作用。现已经作为基因治疗癫痫大鼠的重要神经递质。 Tau蛋白是一种与微管组装密切相关的含磷糖蛋白。磷酸化Tau蛋白是神 经纤维受损形成的产物。 本研究通过建立规范的大鼠癫痫模型，应用腺相关病毒基因转染技 术，以NPY为治疗基因，以重组腺相关病毒为载体，将NPY基因转染到 痫病理状态下的脑组织中可以实现有效表达，且脑室注射途径优于海马注 中文摘要 射途径，故本实验主要采取脑室注射途径)，观察重组腺相关病毒介导人 acid， 达变化。 目的：探讨重组腺相关病毒介导人源性神经肽Y基因 (rAAV2／1-hNPY-EGFP)转染对红藻氨酸(kainicacid，KA)诱导大鼠癫 痫发作行为、EEG及其海马磷酸化Tau蛋白的影响，以探讨其在癫痫发 病机制中的作用以及NPY基因转染对慢性癫痫治疗的可能机制。 方法：72只雄性Wistar