人类巨细胞病毒染对脐血粒单系祖细胞增殖过程中hoxa5，hoxb6基因表达的影响.pdfVIP

人类巨细胞病毒感染对脐血粒单系祖细胞 增殖过程中HOXA5，HOXB6基因表达的影响 摘 要 Cell，HSPC)向粒单系( Stem-Progenitor Colony Forming 因表达的情况，并且用人类巨细胞病毒(Human 和／或全反式维甲酸( 明确HCMV抑制脐血粒单系祖细胞增殖的机制，以及ATRA能有效治疗粒 系白血病，尤其是急性早幼粒细胞白血病的可能机制。方法：1．脐血标本 由本院产房提供，取自正常足月顺产新生儿断脐后的胎盘段脐血。2．实验 分组。实验分4组：(1)空白对照组：不加病毒液，代之等量IMDM加入 culture 0．1ml 量(tissue infectious，TCID50)10’45／0．Iml，按100TCID50 集落刺激因子(Granulocyte—macrophage 后，在培养过程第3天，7天和12天的粒单系祖细胞集落(ColonyForming 定粒单系祖细胞。5．分别抽提各时间点，各不同分组细胞总RNA。6．将 抽提到的各时间点，不同分组细胞总RNA逆转录为CDNA，通过实时定 chain 量PCR技术(Real—timeQuantitativePolylnerase 测各组细胞增殖分化过程中HOXB6、HOXA5基因的表达情况。7．随机 方差分析，组间均数两两比较用LSD法。由统计学软件SPSSl3．0完成。 结果：(1)人类造血干祖细胞向粒单系祖细胞增殖分化过程中，正常对照 律表达，且表达多为阴性。(2)HOXB6基因在各组均表达，且表达强烈。 组，HOXB6基因均在增殖分化的第7天表达最强烈，第12天表达明显 组比较， 污染条带，无明显降解条带，表明提取的总RNA纯度较高。(8)1．5％琼 带，说明引物设计合成无误。(9)RQ-PCR方法定量目的基因具有特异性 好，灵敏度高等优点。结论：1．HOXA5基冈可能不是人类造向．干祖细胞 向粒单系祖细胞增殖分化过程的主控基因。2．HOXB6基因是人类造l缸干 祖细胞向粒单系祖细胞增殖分化过程的主控基因之一‘。3．HOXB6基闻在 人类造血干祖细胞向粒单系细胞的正常增殖分化过程中呈现时间上的规律 续作用，表现为ATRA抑制HCMV引起的HOXB6基因下调效应。 关键词：巨细胞病毒；粒单系祖细胞；体外扩增：实时荧光定量PcR； HOXB6基因；HOXA5基因 EffectofHuman tothe of CytomegalovirusExpression homeoboxontheProliferationof HOXB6、HOXA5 gene inVitro Progenitor Granulocyte·macrophage isto the observe ofHOX Abstract：objective：Theobjective expression B6 A5 onthedifferentiationand of gene、HOXgene proliferation