人系鼻咽癌细胞照射与肿瘤多药耐药基因及其p-糖蛋白的表达的研究.pdf

人系鼻咽癌细胞株照射与肿瘤多药耐药基因 及其P．糖蛋白表达的研究 硕士研究生：王辉 指导导师：王若雨 教授 指导小组：石静滨 教授 吕 申 教授 专业名称：肿瘤学 摘 要 目的：临床治疗中经常可以观察到放射治疗可以导致下一步化疗 的有效性降低，机理尚不清楚，放射治疗导致肿瘤多药耐药蛋白p-糖 化疗疗效降低的一个重要原因，而且P—gp和mdrl的变化可能与放疗 方案有重要的关系。本试验模拟临床分割放疗方法对鼻咽癌CNE细胞 的生存率，明确分割放射前、后CNE细胞肿瘤多药耐药蛋白P—gp及mdrl 的表达随时间变化的情况。 方法：对鼻咽癌CNE细胞进行体外培养，待细胞进入指数生长期 后模拟临床放疗方法进行X一射线分割照射， 2GY／天／次，连续5天照 射，总剂量IOGY。于照射前、照射开始后的第4天、第8天、第13 天、第17天、第21分别取标本进行检测。利用RT-PCR检测分割放射 前、后鼻咽癌CNE细胞mdrl的表达；利用Westernblotting、免疫细 胞化学检测放射前、后鼻咽癌CNE细胞P。gP的表达；利用MTT法检 评价细胞的功能。 测其半数抑制率(ICso)的变化， 结果： 鼻咽癌CNE细胞mdrl基因分割照射前呈弱表达，照射开 始后的第4天过度表达，第8天到第21天表达降低：其编码的蛋白产 物p-gP照射前、照射的第4天及第8天呈弱表达，第13天到第21天 表达增高，P—gp增高出现的时间比mdrl基因增高出现的时间晚9天， 降低出现的时间也明显晚于mdrl降低出现的时间。MTT法检测半数抑 制率(ICw)结果显示：照射前、照射开始后的第4天及第8天半Ic。 值为6．25，第13天到第2l天I C50分别增高为50、62．5、70，IC。值 变化的情况与P—gp的变化情况相一致。 结论：鼻咽癌CNE细胞分割照射前mdrl及P—gp呈弱表达，可能 有原始的低度耐药性；分割照射后出现mdrl及P—gp的过度表达并且 持续一段时间。提示：(1)临床肿瘤治疗中，鼻咽癌分割放射治疗后 多药耐药基因mdrl及其P—gp表达增高；(2)根据分次照射后鼻咽癌 CNE细胞P—gp的过度表达与IC。增高的变化情况同步的现象，可以初 步推断P—gp的过度表达可能为功能性的；(3)鼻咽癌放疗后的病人序 贯治疗时最好不立即给化疗药物，待mdrl及P—gp的过度表达降低后 再实施治疗。 关键词： 鼻咽癌CNE细胞株细胞培养 x一射线照射 肿瘤多药耐药基因 P一糖蛋白 ·2· of resistanceandits Expressionmultidrug gene protein in carcinomacells nasopharyngeal with irradiation exposure Master Hui Degree Candidate：Wang Ruoyu Supervisor：ProfessorWang Shi Guidinggroup：ProfessorJingbin