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人血管内皮生长子165克隆表达及其生物学功能的研究
人血管内皮生长因子165克隆表达
及其生物学功能的研究
硕士研究生:张明辉
指导教师:安广宇 教授
专业名称:内科学
摘 要
目的:构建人血管内皮生长因子165(Vascularendothelial
growth
factor
VEGFl65真核表达载体并将其转入人慢性髓系白血病急变细胞株
通过自分泌途径对肿瘤生长发挥作用,从而为临床上恶性血液病抗血
管新生治疗的部分机理提供实验依据。
码序列(不包含前面8
lbp的信号肽序列及终止密码子),将其插入质
均用EcoR/和SalI双酶切,回收纯化目的基因片段与表达载体,构建
BL2 Resin纯化,
1(DE3)pLysS,IPTG诱导表达,表达产物用Ni.NTA
SDS.PAGE及WesternBlot鉴定重组蛋白。用RT-PCR法从人白血病细
I
响。
结果:1.测序结果示扩增的VEGFl65序列与文献报道相符。
3.Western
Blot分析表明重组蛋白可与兔抗人VEGF单克隆抗体特异性
Blot均见亮度明显增强的表达
K562(K562/M)千N比,RT-PCR和Western
亡率分别为5.1%、14.9%和12-3%、35.8%。
结论:成功克隆了人血管内皮生长因子165DNA片段,并在大肠
其增殖,抑制其凋亡。
关键词:血管内皮生长因子 克隆 表达 K562
增殖 凋亡 三氧化二砷
onthe and
Study Cloning/Expression
Biological
Functi
onsof
Vascular
endothelial
factor165
growth
Postgraduate:ZhangMinghui
Supervisor:Prof.An
Guangyu
medicine
Specialty:Internal
Abstract
constructa vectorofvascular
objeetive:To procaryotic
expression
endothelial
factor
1 1 to 1
growth 65(VEGF VEGF65in
65)a
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