人脐血单个核细移植在心肌梗死大鼠中的促新生血管作用.pdf

A脐血单个棱纲胞移植在心舰梗死大靛申豹促新生盘管作用 人脐血单个核细胞移植在心舰梗死大鼠中 的促新生血管作用 专 、韭：心蠹摹毒 硕士研究生：杨燕华 导 师：胡承悔副教授 摘 要 研究背景： 急槛心肌梗死(AMI)是危害人类健康的世界往问题，药物治疗和早期PCI 治疗已经明显降低死亡率，但心肌细胞是终末细胞，心肌梗死街心室重构所皲缺 蛊牲心曩簌癍、心衰仍怒心蠢管医生黉嚣螨戆重大攘泼，于纲腿移攘潞疗为这豢寒 了曙光。 用于治疗急性心肌梗死的干细胞主要是胚胎干细胞、骨髓干细胞(造血干细 照，阗充震予绍戆及边缘缀麓)、鸯魏腿于细脆簿，露鲜见黪疯于细照移建溺予 治疗急性心肌梗死的报道，但它有不少其它干细胞无法取代的优点：由于脐觑免 疫原性较弱，可以允许在较大的HLA差异情况下j艘行移植；由于胎盘屏障作用， 黉播疾瘸熬危险性小；蠢更强豹分纯戆力帮增毽黢力；|l囊差黪斑霹懿建立秘繁理 的完善，脐血可储存在库，需要时立即取用，故脐觑干细胞的研究越来越受到重 视。 近年臻国连努不少旗泰或实验·隧硬突证实予缀整移蓬治疗慧瞧心鼹矮露霹 明显改善心功能，其机制可能是：干细胞发育而采的肌纤维限制了心室壁的变薄 或参与收缩功能；干细胞可分泌多种生长因子，促进心肌修复和移植物的生长； 于鲴愍移壤磊势纯为类心魏绥鼹，炎平潺飘爨戆，炎肉瘦绥滕，共匿涎遗蠢蛰委 生，使一部分心肌得到存活，限制瘢痕组织的扩大。但以上机制尚未达成充分若 人脐血单个核细胞移植在心肌梗张大鼠中的僻新生血管作用 识，越来越多研究对干细胞分化为有收缩功能的心肌细胞提蹦质疑，而干细胞移 植麓促进心蔽毛纲巍管增生献雨改善心功藏去|j越来怒受裂关注。 endothelial 鹿管内皮生长因子(Vascular growthfactor，VEGF)是迄今撩定 出来的最羹爱的血管生成因子，现已发现的VEGF家族成员包括VEGF。A、 最密切的是VEGF。A。 本文主要探索黪盘单个竣缨麓猡撞蜃在大羲心照梗延髑边区健囊生盘镑作 用以及VEGF．A的表达变化，并相应地观察急性心肌梗死大鼠心功能的改变。 霹时，本磁究氇验诞了蘩盘零个棱缨蕤箨为予缓麓灏疗静一释重要缀耱来滚麓可 行性和相应优点。 研究强的： 1．礤究急缝心蕊壤死大鼠在天骑巍擎个梭绣壅移獯爱心整粳死嗣边区毛绸癜管 增生的改变。 2．研究脐血单个核细胞移穗后大鬣心脏VEGF的表达变讫教特点。 3．研究人膦血单个核细胞移植对急性心肌梗死大啜与心功能改善的作用及其应 用于急性心肌梗死的可行性。 研究材料与方法： 1． 30份脐血均来自中山大学附属籀一医院产科，经6％羟己基淀粉(贺斯)及 1．0779／1ficoll--paque分离液分离出脐血单个核细胞。cD。。阳性细胞是较 蒙媳懿纲照，熊囱多耪戏熬缨怼分诧，镪括心腿缀照积系细盎管肉皮细熬等， 移植前用流式细胞仪分析cD。。阳性细胞含量。另外，为明确移植细胞的去向， 穆{妻蘩躅BrdU标记缀熬，BrdU虿班代餐藏豫噔嚏在DNA台残麓矮取，整舍 到分裂细胞DNA中，移植后用抗BrdU免疫组化染色检测。 2． wistar雄性大鼠75只(购自中由大学动物中，办)随耩玢为：移植组惫性 心肌梗死+细胞移植)30只、对照组(惫性心肌梗死)30只和假手术组15 Ⅱ 人脐血单个核细胞移植在心肌梗死大馘中的促新生m管作用 只。攘开胸结扎前降支近段的方法建立急性心肌梗死模型，移植组梗死用边 区心虢蠹注入膀盘筚个孩细藏2×105／pL，对照缰同一部位注入等量瑶莽蓥， 假手术组开胸，穿针过线，不结扎。 3． 移檄届4周用左心导管及多导生理记录议进行心功能检测，以及用免疫缌化 方法行心薤梗死溺边区毛细盘餐：密度嚣定及BrdU阳性细藏检测：在移植菇第 4天，第7天，第14天，第28天分别对对照组和移植组取