人脑胶质瘤中促管生成素-2的表达与血管形成相关性研究.pdf

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人脑胶质瘤中促管生成素-2的表达与血管形成相关性研究

中文摘要 人脑胶质瘤中促血管生成素一2的 表达与血管形成的相关性研究 摘 要 目的:胶质瘤是中枢神经系统中最常见的恶性肿瘤,特 别是胶质母细胞瘤的术后复发率高,五年生存率低。它是一 种富含血管的恶性肿瘤,且具有浸润性生长的特点,血管的 生成有利于肿瘤的生长、侵袭和转移。侵袭性生长是脑胶质 瘤细胞疗效差的主要原因之一,而新生血管是肿瘤侵袭性生 长过程中的必然现象。故研究胶质瘤发生、发展、侵袭和转 移的特征有着积极的现实意义。肿瘤的生长、侵袭和转移依 赖于肿瘤性的血管生成。而肿瘤的血管生成又受血管生成促 进因子和血管生成抑制因子的共同调节。促血管生成素 细胞生长因子(VEGF)有协同作用,在肿瘤血管生成中起着至 关重要的作用。胶质瘤是典型的血管依赖性实体肿瘤。因此 研究Ang一2和VEGF相关的分子生物学机制,可以为治疗脑 胶质瘤提供新思路。本研究的目的是通过对脑胶质瘤中 的关系及在胶质瘤生长、侵袭和转移中的作用及与胶质瘤恶 性程度与预后的关系。 方法:选取2003年~2004年于河北医科大学第二附属 医院神经外科行脑胶质瘤手术切除的新鲜胶质瘤标本49例, 中文摘要 岁。其中60岁者35例,60岁者14例。临床症状出现时 间5天~2年,平均两个月。所有患者术前均未行化疗、放 疗及免疫治疗。肿瘤临床病理按WHO(2000)神经系统肿 瘤分类标准进行分类和分级,其中I级10例(毛细胞性星 形细胞瘤8例,脉络丛乳头状瘤2例);II级9例(纤维性星 形细胞瘤4例,原浆性星形细胞瘤2例,少枝胶质细胞瘤2 例,肥胖细胞性星形细胞瘤1例);HI级13例(间变性星形 细胞瘤11例,间变性室管膜瘤2例);Ⅳ级17例(胶质母 细胞瘤12例,链母细胞瘤5例)。另取5例取自同期因急性 颅脑损伤行内减压手术的正常脑组织作为对照,其中男3例, 女2例。每例标本均分为两部分:一部分于术中离体30分 钟内取材,立即置入液氮速冻,并保存于一80℃冰箱,用于 RT-PCR;另一部分标本均用4%多聚甲醛固定,常规石蜡包 埋,用于免疫组织化学染色。每例标本做5um厚连续切片备 用,并做HE染色确定诊断。 免疫组织化学染色法检测蛋白水平的表达:应用S.P免 疫组织化学方法检测促血管生成素.2、VEGF及微血管密度 (Mcrovasculardensity,MVD),每种免疫组化染色均设阳性和 阴性对照。结果判定促血管生成素.2阳性染色均定位于肿瘤 细胞和血管内皮细胞的胞质中,阳性细胞成不均散分布。 VEGF表达在胶质瘤细胞质中,呈棕黄色,不均散分布。以 高倍视野(×400)下阳性细胞数量综合判断,采用半定量 分析法。每张切片随机选择5个以上高倍视野,镜下视野清 晰,无坏死、出血,计数1000个肿瘤细胞的阳性率。每个 玻片计数1000个肿瘤细胞,求出阳性细胞百分数,用标记 指数(Labelling 中文摘要 计数细胞数X100%。同时分别将阳性肿瘤细胞分为4个等 级:无阳性细胞为“一”;阳性细胞30%为“+”;阳性细胞 30%~60%为“++”;阳性细胞60%为“+++”。 所有结果应用SPSSll.5软件包进行统计处理,mRNA 示。对结果采用t检验,方差分析,卡方检验,秩和检验及 直线回归及相关分析等方法。检验标准采用p0.05有统计学 意义。 结果:本实验共检测了胶质瘤49例,正常脑组织5例 作为对照,Ang.2、VEGF、MVD在正常脑组织及不同恶性 度胶质瘤中的表达以及它们之间的相关性如下: 1 Ang.2阳性染色均定位于肿瘤细胞和血管内皮细胞 的胞质和胞核中,其中大部分在胞核表达,Ang.2蛋白在49 例胶质瘤中均有表达,5例正常脑组织中Ang.2蛋白无阳性; 在lO例I级胶质瘤中Ang一2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均 肿瘤细胞的百分率均数为O.2202±0.0083;在13NIII级胶质 瘤中Ang.2蛋白阳性肿瘤细胞的百分率均数为O.2809± 白在肿瘤与正常脑组织交界处,肿瘤内坏死组织周围高表 达,两者周围区低表达。由此可见胶质瘤组织中Ang一2阳性 蛋白表达率明显高于正常脑组织,且在恶性度高的胶质瘤明 显高于低度恶性的胶质瘤中的表达率。经统计学X2检验分 析其差别非常有

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