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兰州大学硕士论文 兰州地区头癣的病原学研究 兰州地区头癣的病原学研究 摘要 头癣(tinea capitis)是指累及头皮和毛发的浅部真菌感染性疾病。它是一种 接触性传染病，多累及儿童及少年。头癣的发生与人们的生活水平、卫生和居住 有一定的相关性。头癣曾在我国广泛流行，严重危害着广大少年儿童的身一tL,健康。 解放后在全国范围内开展了对头癣病的人群防治工作，经过几年的努力，至上世 纪70年代末和80年代初基本消灭了头癣。近年随着城市饲养宠物者越来越多， 头癣的发病在某些地区有增加的趋势。已有许多学者报道了各地区头癣病原菌的 调查情况，发现头癣的致病菌种随着时间发生变化，且存在地区差异。尚未见近 年来兰州地区头癣的发病情况及病原学流行病学的详细资料，故了解兰州地区头 癣病原菌菌种构成与变化特点，对该病的流行病学调查和人群防治工作具有重要 意义。 目的：1．了解兰州地区头癣发病情况及病原菌菌种分布和变迁特点，为头 癣的流行病学研究奠定基础，同时为临床抗真菌药物的合理应用提供理论依据。 2．探讨PcR—RFLP和RAPD等分子生物学技术鉴定皮肤癣菌的特异性和敏感 性，以便在头癣病原真菌的鉴定中推广应用。 方法：2005年1月--2005年12月，对兰州大学第一医院、兰州大学第二医 院及兰州军区总医院皮肤科门诊拟诊为头癣的患者，分别取其断发、头屑和／或 脓癣分泌物做15％KOH直接涂片镜检。采用调查问卷的方式，详细登记镜检阳 性患者的相关临床资料。对阳性标本行沙堡葡萄糖琼脂及米饭培养基分离培养、 进行PCR扩增，依据其扩增的基因片段鉴定到犬小孢子菌种的水平。并用HinfI、 Mva I和TaqI三种限制性内切酶对其扩增产物进行限制性片段长度多态性 (RFLP)分析；采用4条引物对犬小孢子菌进行随机扩增多态性DNA分析 (RAPD)，对60株犬小孢子菌进行了种内菌株分型。 兰州大学硕士论文 兰州地区头癣的病原学研究 例(12．38％)。镜检均为发外孢子和，或菌丝，以孢子为主。分离菌株93株(阳 性率88．57％)，其中犬小孢子菌90株(占培养结果的96．77％)，红色毛癣菌、 I 孢子菌均扩增出一约750bp的特异性条带。3．HinfI的酶切片段完全相同；Taq 的酶切产物也未见差异；而MvaI的酶切产物在种内分成4型，型间差异明显。 的RAPD扩增带型稳定、清晰，把60株犬小孢子菌共分为8型12个亚型，呈现 明显的种内多态性。 结论：1．兰州地区头癣的临床类型和致病菌种已经发生了变迁，优势致病 菌由40多年前的铁锈色小孢子菌变迁为犬小孢子菌；2．引物ITSl、ITS4可以把 。 犬小孢子菌特异地鉴定到种的水平，从而使临床快速鉴定该菌成为可能；3．内切 I也可以特异地鉴定犬小孢子菌，而Mva 酶HintI和Taq I可以对犬小孢子菌进 行种内分型：4．多引物RAPD分析可以将犬小孢子菌分成不同的基因型。、 关键词：头癣，犬小孢子菌，内转录间隔区，限制性片段长度多态性分析， 随机扩增DNA多态性分析、 n 兰型查兰堡主笙壅 ． 兰塑垄垦!塑塑堕垦兰堡窒 A of OHTinea StudyEtiology Capitis in LanzhouDistrict ABSTRACT Tinea isakindof whic