动脉灌注vm-6对鼠脑胶质瘤治疗作用及其机制的研究.pdf

中文摘要 动脉灌注VM-26对鼠脑胶质瘤治疗作用 及其机制的研究 摘 要 目的：胶质瘤是神经系统危害最大的一类肿瘤，它里浸 润性生长，手术难以根治，目前多采用以手术为主，结合放 疗、化疗的综合治疗。化疗药物多采用低分子，脂溶性高， 易透过血脑屏障的药物如鬼臼毒类衍生物来治疗。本实验采 用卫盟(Ⅵ垤一26)对大鼠脑胶质瘤进行治疗，此药物是鬼臼 毒的半合成衍生物，是常用的胶质瘤化疗药物，抗瘤谱广，具 有高度脂溶性，能通过血脑屏障，破坏脱氧核糖核酸，主要作 用于DNA拓朴异构酶II，导致双链或单链破坏；阻断肿瘤细 胞分裂增殖的途径，抑制增殖期肿瘤细胞的增殖，此外还能 够诱导肿瘤细胞产生凋亡。给药途径上分为动脉灌注及静脉 输入两种途径。静脉途径化疗在临床上具有应用广泛，操作 简单方便、价格低廉等优点，其治疗效果已得到临床上的证 实，但由于其通过体循环进入肿瘤组织，透过血脑屏障能力 差，全身毒副作用大，无法进一步提高肿瘤组织的血药浓度， 成为提高其疗效的瓶颈。而动脉化疗由于选择肿瘤组织的供 血动脉进行灌注，提高了药物对肿瘤治疗的针对性以及肿瘤 组织内部的血药浓度，增加化疗药物的利用度，此外，还可 减少对身体非靶器官的毒副作用。本实验通过两种不同途径 给予化疗药物VM-26，分别观察大鼠脑胶质瘤肿瘤体积的变 化以及生存期的不同，以及肿瘤细胞核增值抗原(PCNA)， II)和凋亡情况的变化，从而从整体上 拓扑异构酶一II(topo 中文摘要 来观察药物的治疗效果，研究药物作用机制；观察动脉灌注 途径的化疗效果，为临床应用提供理论指导。 方法：培养9L大鼠脑胶质瘤细胞，细胞生长状态良好 时，取对数生长期细胞，调整细胞数量为106～107，利用微 量加样器于右侧尾状核附近接种于大鼠颅内，10天后行MRI 检查，确认成瘤后，将24只大鼠随机分为三组，每组8只， 分别通过大鼠鼠尾静脉(静脉组)及颈动脉(动脉组)给予化 疗药物vM一26，另设生理盐水对照组，各组大鼠化疗前半 小时静点甘露醇开放血脑屏障，在大体上观察各组大鼠肿瘤 体积大小变化以及生存期的不同；在给予不同途径治疗后一 周，处死大鼠，在接种部位取材后，在蛋白及分子水平上观 察肿瘤细胞的增殖及凋亡情况，采用PCR技术观察肿瘤细胞 II的变化；流式细胞技术观察肿瘤细胞PCNA、 PCNA及topo II以及凋亡的变化情况；免疫组化方法观察肿瘤细胞 topo PCNA的变化情况。 结果：1各组大鼠生存期平均为：动脉组为27天，最长 为3l天；静脉组为25天，最长为27天；对照组为21天， 最长为26天。2MRI扫描结果：动脉组大鼠经治疗后肿瘤 生长速度最慢，静脉组其次，对照组最快。结果经q检验， P0．05，差异有显著性。3PCR检测结果：动脉组和静脉组 II表达低于对照组，动脉组两者表达同时也低 PCNA及topo 于静脉组，经统计学分析，采用q检验，P0．05，差异有显 达最低，静脉组其次，对照组最高，动脉组肿瘤细胞凋亡率 最高，静脉组其次，对照组最低，结果经统计软件分析，采 用q检验，P0．05，差异有显著性。5免疫组化方法检测 中文摘要 PCNA表达结果：动脉组表达最低，静脉组其次，两者又明 显低于对照组的表达，经统计软件分析，采用q检验，尸 0．05，结果有显著差异。 结论：1成瘤大鼠经治疗后，PCNA表达减少，肿瘤细 胞增殖速度减慢，肿瘤生长受到抑制。2治疗后肿瘤细胞 II表达减少，可有效阻断细胞分裂生长，对肿瘤细胞增 topo 殖分裂具有抑制作用。3两组治疗组大鼠经治疗后肿瘤细胞 凋亡明显增多，可见药物可导致肿瘤细胞凋亡，对于控制肿 瘤生长具有重要作用。4动脉组大鼠肿瘤细胞增殖低于静脉 组，凋亡率高于静脉组，可见VM一26经动脉灌注对肿瘤细 胞抑制作用更加明显，动脉途径化疗能更有效的通过血脑屏 障，对肿瘤细胞产生更好的治疗效果。 关键词：脑胶质瘤；动脉灌注；细胞核增殖抗原；拓扑 异构酶II；凋亡；化疗 英文摘要 o