复方中药牛黄天胶囊体内抗小鼠宫颈癌作用及其机理研究.pdf

中 文 摘 要 复方中药牛黄天龙胶囊的体内抗小鼠宫颈癌作用 及其机理研究 摘 要 目的:恶性肿瘤严重威胁着人类的健康和生命。近年来， 肿瘤的发病率呈上升趋势。对于女性来说，妇科肿瘤已成为 其健康的主要威胁。其中宫颈癌是常见的恶性肿瘤之一，居 妇女恶性肿瘤的首位 (35-72%)，在女性生殖器恶性肿瘤中 占58.5-93.1%. 在祖国医学传统名方“犀黄丸”的基础上组创的“牛黄天 龙饮”经初步试验证实对人卵巢上皮性癌和其它中胚层来源 的肿瘤细胞有明显的抑制生长作用，值得进一步的研究开 发。为了便于服用研制出了“牛黄天龙胶囊”。本次试验的药 效学结果表明复方中药“牛黄天龙胶囊”对实体型 (小鼠肉瘤 S180、小鼠肝癌H22、小鼠宫颈癌UI4)和腹水型 (小鼠宫颈 癌UI4)动物肿瘤有明显的抑瘤效果，并通过对小鼠宫颈癌 肿瘤的作用来深入探讨其作用机制。有利于临床作为对妇科 肿瘤，尤其是宫颈癌的抗肿瘤制剂。 该实验对 “牛黄天龙胶囊”进行了急性毒性试验以测定其 半数致死量;采用测荷瘤小鼠瘤重、抑瘤率等指标来检测“牛 黄天龙胶囊”对小鼠实体型肿瘤 (S18o,HZ:和U14)的抑制作 用以观察“牛黄天龙胶囊”的体内抗肿瘤活性;观察了“牛黄天 龙胶囊”对荷U14腹水瘤小鼠的生存率的影响;通过检测胸腺 指数、脾脏指数等指标观察“牛黄天龙胶囊”对动物的主要免 疫器官的影响。该试验应用流式细胞术检测肿瘤细胞的凋亡 中文 摘 要 率，应用免疫组化法来观察该药对肿瘤血管生成及肿瘤组织 金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响，应用MTT法观察对 荷瘤小鼠的NK细胞活性的影响等来探讨“牛黄天龙胶囊”抗 月中瘤的作用机制。 方法:1.应用中药药理急性毒性试验方法，以不同浓度 的“牛黄天龙胶囊”冲剂一次性对大鼠灌胃，给药后观察其中 毒表现和死亡情况共7天，应用Bliss法 (正规LDS。计算) 计算出“牛黄天龙胶囊”对大鼠的半数致死量(LD5o)。在此基 础上，估算小鼠的药效学的高、中、低剂量。 2.将SIN、HZZ,U,、细胞株分别种植于50只小鼠体内造 成实体瘤动物模型，将每种荷瘤小鼠分为5组，每组10只， 分别为高、中、低浓度组，阴性对照组及阳性对照组。高、 中、低浓度组分别给予高、中、低浓度 “牛黄天龙胶囊”冲剂 灌胃，阴性组给予等体积生理盐水灌胃，造模后24小时给 药，每天一次，连续 12天;同时阳性组腹腔注射化疗药物 顺铂，每天一次，共6天。分别计算“牛黄天龙胶囊”对此三 种实体瘤的抑瘤率和胸腺、脾指数并进行统计学处理。 3.建立50只U14腹水型动物模型，依上法分组，于接种 24小时后依上法给予药物，每天一次，连续 12天，阳性组 腹腔注射化疗药物顺铂，造模6天后给药，每天一次，连续 6天，观察记录动物存活情况，直至自然死亡，计算其生命 延长率。 4.应用流式细胞检测仪检测U,;实体瘤的凋亡率。采用 免疫组化SP法检测U,;实体瘤中血管内皮生长因子(VEGF) 及肿瘤组织金属基质蛋白酶-9(MMP-9)的表达。应用MTT 法检测荷U,;实体瘤小鼠体内的NK细胞活性。 z 中文 摘 要 结果:1、据 “牛黄天龙胶囊”的急性毒性试验所得的数据， 应用 Bliss法计算的“牛黄天龙胶囊”对大鼠的半数致死量为 55.60g/kg(生药)，换算为胶囊剂型为22.24留吨。根据药效试 验一般每日量可给予半数致死量的1/3-1/5，设定药效试验的 高、中、低剂量分别为4.44g/kg,2.22g/kg,I.lIg/kg(制剂)。 2,“牛黄天龙胶囊”对S18。动物模型的抑瘤率分别为:高 浓度中药组47.69%、中浓度中药组32.93%、低浓度中药组 25.49%。三组之间肿瘤重量比较均有显著性差异 (P0.01), 且分别和阴性对照组比也有显著性差异 (P0.01)0 对H22动物模型的抑瘤率分别为:高浓度中药组50.74%, 中浓度中药组29.65%、低浓度中药组 12.80%。三组之间肿 瘤重量比较