实时定量pcrpmp22基因重复或缺失突变检测中的应用.pdfVIP

实时荧光定量PCR在PMP22基因重复或缺失突变 检测中的应用 摘要 背景 腓骨肌萎缩症(Charcot-Marie．ToothDisease，CMT)又称为遗传 and motor sensory 性运动感觉神经病(Hereditary 是一类具有明显临床和遗传异质性的遗传性周围神经病，发病率约为 1／2500。主要呈常染色体显性遗传(AD)，也可呈常染色体隐性遗传 行性对称性远端肌肉无力和萎缩、腱反射减弱或消失、轻到中度远端 感觉减退。依据病理和电生理特点可分为两型：脱髓鞘型(CMTl型)， 神经活检示广泛的节段性脱髓鞘和髓鞘增生，形成“洋葱球”样结构； 轴突型(CMT2型)，其NCV减慢不明显(正中神经运动传导速度 22， protein 中最常见的类型，由周围髓鞘蛋白22基因(peripheralmyelin PMP22)重复突变或点突变引起。同时，PMP22基因缺失突变引起遗 to liability 传性压力易感性神经病(hereditaryneuropathy、vithpressure 扩增短串连重复序列(PCR．STR)和终点定量PCR等基因诊断方法。 在欧洲被广泛应用，但其敏感性比实时定量PCR差，而且在检测时需 要父母的DNA样本。终点定量PCR也曾被应用，但结果并不可靠。实 时荧光定量PCR在检测单基因大片段重复或缺失时，是一种简便、灵 敏、快速、重复性好的诊断方法。 目的 应用实时荧光定量PCR在中国人群临床诊断为腓骨肌萎缩症的 22，PMP22) 患者进行周围髓鞘蛋白22基因(peripheralprotein myelin 重复或缺失突变的检测。 方法 采用实时定量PCR，以ALB基因作内参，对临床诊断为腓骨肌 萎缩症的117个家系先证者和50例正常人进行PMP22基因重复或 缺失突变检测。 结果 50个正常对照均未发现存在PMP22基因的重复或缺失，PMP22 基因起始拷贝数／ALB基因起始拷贝数值波动于O．80～1．25之间；117 个临床诊断为CMT的患者中发现4例患者存在PMP22基因缺失， 17例临床诊断为CMT的患者中有36 之间，基因诊断为m帅P；1 因起始拷贝数值波动于1．50～2．26之间。 结论 首次在国内应用实时荧光定量PCR技术对PMP22基因重复或 缺失进行突变检测，建立了单基因大片段重复或缺失突变检测一新 的基因诊断技术平台；首次在国内作出了由PMP22基因重复突变引 在中国人CMT中所占的比例为31．9％(36／113)；首次在国内应用基 因诊断的方法诊断了4例遗传性压迫易感性神经病患者。 关键词实时荧光定量PCR，腓骨肌萎缩症(CMT)，遗传性 压迫易感性神经病(Ⅷ妤P)，周围髓鞘蛋白22基因(PMP22)，基 因诊断 III Detectionof ordeletionsofthePMP22 duplications geneusing Real-time PCR quantitative