实验性大鼠脑出血肿周围组织胶质细胞纤维酸性蛋白的动态表达.pdf

中文摘要 实验性大鼠脑出血血肿周凰组织胶质细胞 纤维酸性蛋茸的动态表达 摘 要 目的：脑出血(intracerebral hemorrhage，ICH)是临床_I： 常见病和多发病，并以较高的致残率和病死率严重的影响着 人类的健康。脑出血最重要的病理改变是血肿本身及其引发 的继发性血肿周围脑缺血和脑水肿及细胞毒性损伤。近年来 国内外的实验研究表明，脑水肿的形成与血肿周围的脑组织 缺血和血肿本身内容物有重要关系。在脑组织中，星形胶质 细胞占胶质细胞的50％．60％，为神经元的5倍以上，星形胶 质细胞对脑损伤和缺血发生反应，表现为形态、分布和数景 以及生物活性方面的变化，星形胶质细胞不仅在脑的发育和 正常功能中起重要作用，也参与许多疾病的病理过程。胶质 星形胶质细胞的特异蛋白和骨架成分之一，并可作为其特异 性分子标记。本研究拟通过对脑出血大鼠不同时间点【fl_L肿周 围组织GFAP的动态表达以及脑组织含水量的动态变化，探 讨其可能的变化机理与损伤时间的关系，为进一步认识星形 胶质细胞在颅脑损伤及神经修复中的作用机制提供实验依 据。 方法：利用立体定向技术，建立SD大鼠尾壳核自体动 p 脉J缸脑出血模型(701)，并在脑出血后6h、12h、24h、48h、 72h、7d对大鼠进行行为学评分，包括Longa评分法(Longa Score)、Berderson评分法(BerdersonScore)。之后大鼠断头 中文摘要 处死，用干湿重法测相应时间点的脑组织含水量。脑组织含 水量测定法(干湿重法)，脑组织含水量按以下公式诩‘算： 脑组织含水量=(脑组织湿重一脑组织干重)／湿重×100％， 干湿重均测，精确到O．1mg。假手术组大鼠只进针不注血， u 余操作同脑出血组大鼠。生理盐水组注入701生理盐水， 余操作同脑出血组大鼠。采用免疫组化SP法观察出血后6h、 12h、24h、48h、72h、7d大鼠脑组织的GFAP的表达情况； 探讨其表达规律；常规HE染色观察大鼠脑组织的病理改变， 观察基底节区域的血肿及其周围的水肿带，神经元和胶质细 胞的改变。 结果：①脑出血后行为学的改变： ICH后大鼠在不间 时间点出现行为学异常。所有脑出血组和盐水组大鼠术后6 h、12h行为学评分都高，可能是由于药物麻醉和手术创伤 所致，没有特殊意义。出血后24h评分明显升高，48h达高 h 峰，并持续到72h。早期生理盐水组评分高于假手术组48 到72h时后两组没有差别，提示行为学异常与脑损害程度一 h 致。②脑组织含水量测定结果：大鼠自体动脉血ICH后24 h达 开始，患侧脑组织含水量高于同侧脑组织及对照组，48 高峰，并持续到72h，至7d大致恢复正常，脑出血对脑组织 的影响明显高于对照组。同时也提示，生理盐水的占位效应 对脑组织的影响早期比较明显。③免疫组化：实验性大鼠脑 出血血肿周围组织GFAP的动态表达：大鼠ICH后，出血病 灶周围有明显的免疫反映的阳性细胞，且在不同时间点阳性 h 细胞的数量和形态表现不同。ICH后6GFAP表达最强， 阳性细胞体肥大，突起增粗，阳性细胞数量较多(6h为135 中文摘要 显的统计学意义的差别俨0．05)；72h后GFAP阳性细胞数 较都有明显的差别(PO．05)。脑出血后7d，阳性细胞数量 0．05)，与12h和24h比较则没有明显差别俨O．05)。在所 有观测时间点，非出血侧相应脑区仅有微弱的GFAP免疫反 映阳性。盐水组各时间点阳性细胞数分别为73±10．72，72．6 O．05。假手术组各时问点阳性细胞数分别为6