实验性糖尿病大肾脏色素上皮衍生因子和转化生长因子βlt;,1gt;的表达及作用探讨.pdfVIP

中文摘要 实验性糖尿病大鼠肾脏色素上皮衍生因子和转化生 长因子p。的表达及作用探讨 摘 要 目的：糖尿病肾病(diabetic 重要的慢性微血管并发症之一。长期高血糖及其引起的代谢 紊乱，通过激活多种途径导致肾脏结构的不可逆改变，是终 末期肾病的主要原因。DN的主要病理特征为肾小球硬化、 基底膜增厚、细胞外基质(ECM)沉积等。目前DN的发病机 growth 达可能通过促进肾小球细胞增殖、肥大，导致ECM堆积， 损伤滤过屏障，介导间质纤维化及加速细胞凋亡等机制促进 一个新靶点。有研究显示肾脏存在的色素上皮衍生因子 (pigmentepithelium．derived 制TGF J3。等途径起到肾脏保护作用。PEDF存在于人体多种 组织器官，是具有高效的抑制新生血管形成和营养神经等多 种功能的糖蛋白。研究发现，PEDF在代谢性疾病特别是糖 尿病视网膜病变(DR)中，有明显的保护作用。PEDF水平下 降可能是DR发生的原因之一。细胞培养和动物试验结果均 诱导的糖尿病大鼠体内注射腺病毒表达的PEDF，可以明显 减轻糖尿病早期微量白蛋白尿，提示PEDF对糖尿病肾脏有 保护甚至治疗作用。 中文摘要 因此，本研究通过腹腔注射大剂量STZ，建立l型糖尿 病大鼠模型，并观察该模型的肾脏病理改变和肾功能变化。 检测。肾脏病变前后，肾皮质PEDF和TGFpl的蛋白表达水平 机制的可能关系。 方法：雄性SD大鼠25只，随机分为正常对照组fNC组， 为已建立l型糖尿病模型。实验全程共持续12周，于实验 的第4、8、12周末分别测定BG。第12周末实验结束前， 测定体重，代谢笼收集24小时尿液，放射免疫分析法测定 24小时尿白蛋白排泄量(U垣)；股动脉放血处死动物，收集 血液分离血清，全自动生化分析仪测定尿素氮(BUN)、血肌 清色素上皮衍生因子(PEDF)水平。留取。肾脏称重，固定组织 进行HE染色，观测肾脏形态及病理变化，用免疫组织化学 TGFl3，的蛋白表达水平。 结果 1造模72小时后，DM组较NC组大鼠BG明显升高， 表明己成功建立l型糖尿病大鼠模型。第4、8、12周末， 中文摘要 JPO．01)。 212周末实验结束时，DM组大鼠体重较NC组下降， 差异具有显著性(P0．01)；DM组肾重／体重较NC组升高， 差异具有显著性(PO．01)。 3 具有显著性(P．0．01)。 不具显著性。 5HE染色结果显示，与正常组比较，DM组肾小球肥大， 基底膜增厚，系膜区基质明显增生，部分肾小管呈空泡变性。 6免疫组织化学分析结果显示，与NC组相比DM组 PEDF表达明显下降，阳性染色的面密度与阳性单位的乘积 而TGFI＆1表达较NC组强。 7 PEDF蛋白表达水平降低，而TGFl3。蛋白表达水平升高，差 异有显著性(p0．01，P0．01)。 NC组略高，但差异不具有显著性(尸e0．1 52)。 结论 l大鼠经腹腔一次性注射大剂量STZ，可建立1型糖尿 病大鼠模型。该模型具有明显的糖尿病表现，与人类1型糖 中文摘要 尿病的临床特征类似。故此模型可用于l型糖尿病慢性并发 症的研究。 2随着高血糖持续存在，糖尿病大鼠肾脏出现不可逆损 害，生理结构破坏，肾功能下降。其形态学和实验室检查均 符合DN改变。因此，该模型可以用于DN的相关研究。 3糖代谢的异常能够影响脂代谢及肝功能，共同对机体 产生不利影响。 组大鼠肾脏的蛋白表达水平明显增加，与肾脏病变一致。提 示其在DN发生过程中具有重要作用。 5PEDF在NC组肾脏有较高水平表达，而在长期高血糖 出现。肾损害后其蛋白表达水平明显下降，且其与TGFB。的蛋 白表达水平呈反相变化，提示二者之间可能存在一定的相互 作用，并且二者之间水平失衡可能影响或预示DN的病程进 展。 脏病变前后无明显变化，提示循环中PEDF水平可能通过其 他途径代偿维持。 关