玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及狉犇犖犃犐犜犛-草业学报.pdfVIP

第 卷 第 期 草 业 学 报 ２２ ２ １７１－１７７ 　 　 　 　 ， 　　 年 月 Ｖｏｌ．２２Ｎｏ．２ ＡＣＴＡＰＲＡＴＡＣＵＬＴＵＲＡＥＳＩＮＩＣＡ ２０１３ ４ 玉米穗腐病样品中黄色镰孢的分离鉴定及 狉犇犖犃犐犜犛序列分析 ， １ １ １ １ １ ２３ 郭成 ，魏宏玉 ，郭满库 ，何苏琴 ，郭建国 ，王晓鸣 （ 甘肃省农业科学院植物保护研究所，甘肃 兰州 ； 中国农业科学院作物科学研究所， １． ７３００７０２． 北京 ； 国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程，北京 ） １０００８１３． １０００８１ 摘要：为了明确甘肃玉米穗腐病的病原菌，于 年 月在甘肃省四大生态区采集玉米穗腐病样品，以组织分离 ２００９ ９ 法进行病原物的分离培养，对分离得到的镰孢菌菌落进行纯化和单孢分离后，以形态学为基础，参照 Ｌｅｉｓｌｅ分类系 统进行鉴定。结果表明，分离到 ２７１株镰孢菌菌株中有 １０５株经形态学鉴定为黄色镰孢，占分离镰孢菌的３８．７％。 分析发现黄色镰孢种群数量随采样区而异，陇东和陇南地区采集的样品中分离频率分别为 ， ，本研究 ５２．０％ ５５．４％ 充分证明了黄色镰孢是甘肃省陇东和陇南地区玉米穗腐病的优势病原菌。按照柯赫氏法则用混合菌株接种法对 沈单 和金穗 进行致病性测定，证实了黄色镰孢对玉米果穗的致病性。随机选取 株黄色镰孢菌株进行 １６ ９６８３２ ３ 基因序列分析，将 产物回收测序后在 上比对，菌株 与 中登记的黄色镰孢 ｒＤＮＡＩＴＳ ＰＣＲ ＧｅｎＢａｎｋ ３１１ ＧｅｎＢａｎｋ 菌株 和 、 和 与黄色镰孢菌株 亲缘关系最近，同源性达 。利用 软 Ｋ１００４ Ｋ２１６６４１ ２１２１ ＣＢＳ１２２．７３ ９９％ ＤＮＡＳｔａｒ 件绘制其系统发育树状图，结果表明，菌株 与 和 、菌株 和 与 位于系统发 ３１１ Ｋ１００４ Ｋ２１６ ６４１ ２１２１