光度法在植物活成分与血清白蛋白相互作用研究中的应用.pdf

摘要 摘要 本论文主要运用紫外．可见吸收光谱、荧光光谱、红外光谱及圆二色谱技术， 研究了血清白蛋白与植物活性成分相互作用的分子机制，并引入化学计量学方 法解析复杂体系的光谱数据，从定性和定量的角度探讨植物活性成分与血清白 蛋白的结合模式，为新药的设计与合成提供理论指导。 论文共分为五个部分，主要研究结果概述如下： 1．综述了药物小分子与蛋白质分子相互作用的研究现状，包括荧光光谱法、 紫外吸收光谱法、红外光谱法以及圆二色谱法在该研究领域的应用情况。 2．采用荧光光谱法、紫外光谱法以及红外光谱法研究了在生理酸度条件下 相互作用形成新的复合物是导致BSA荧光猝灭的主要原因；热力学参数焓变明 和熵变丛值分别为22．10ld·mol-1和166．04J．mol-I．K-。，表明二者之间的作用 力以疏水作用力为主。竞争实验，表明山姜素在BSA上的结合位点位于Domain IIA的疏水腔中，即Site I。同步荧光光谱以及红外吸收光谱研究表明山姜素能 够使BSA的构象发生变化。 3．在生理酸度下，运用荧光光谱和紫外．可见光谱法研究了白杨素、红景天 苷与人血清白蛋白(HSA)的相互作用。研究发现，这两种药物与HSA都有较强 的结合，白杨素对HSA的荧光有猝灭作用，而红景天苷的加入导致HSA荧光 增强。白杨素与HSA主要靠静电作用力结合，而氢键与范德华力是红景天苷结 合作用的主要驱动力。同步荧光光谱和三维荧光光谱研究表明，白杨素、红景 天苷与HSA结合都会引起HSA构象的变化。 4．采用荧光光谱法、紫外光谱法、红外光谱法以及圆二色谱法研究了牡荆 素与人血清白蛋白的结合作用。研究表明，静态猝灭是牡荆素导致HSA荧光猝 灭的主要原因；由求得的热力学参数，确定了二者之间的作用力是氢键和范德 华力。竞争实验，表明牡荆素在HSA上的结合位点位于DomainIIA的疏水腔中， 即Site I。同步荧光光谱、红外吸收光谱和圆二色谱研究表明，牡荆素能够使HSA 动。 。 5．在生理酸度条件下(pH=7．4)，应用荧光光谱技术研究了葛根素与HSA的 摘要 相互作用。实验证明了葛根素能与HSA形成了基态复合物的静态方式猝灭HSA I，SiteII， 体系的荧光。竞争实验选择华法林，布洛芬和洋地黄毒苷分别作为Site Site III位的标记药物，结果发现牡荆素在HSA上的结合位点位于DomainIIA的 疏水腔中，即Site I。同时，以华法林(Site D、布洛芬(SiteII)、洋地黄毒苷(SiteIII) 为荧光标记药物研究了葛根素与探针竞争结合HSA的反应，运用平行因子法 (PARAFAC)解析竞争实验的三维同步荧光光谱数据，获取荧光标记物、葛根素 和HSA．葛根素复合物在平衡时浓度变化趋势及其纯光谱，证实了葛根素结合在 I。 HSA上的结合位点位于DomainIIA的疏水腔中，即Site 关键词：山姜素；白杨素；红景天苷；牡荆素；葛根素：牛血清白蛋白；人血 清白蛋白；荧光光谱：紫外．可见光谱：傅立叶红外光谱；圆二色谱；平行因子 法 Abstract Abstract Inthis modes some active thesis，the between binding plant serumalbuminwerestudied different viz．， using spectroscopic