构树总黄酮对表细胞防护作用研究.pdfVIP

华中科技大学删济医学院 坝p毕业生论文 构树总黄酮对表皮细胞防护作用研究 硕士研究生： 杨雪莹 指导老师： 曹玉广教授 摘 要 表皮的主要作用是形成人体的天然保护屏障，使机体免受外界物理、化学 因素以及微生物侵害，维持人体内环境的稳定。皮肤老化是整个机体衰老在皮肤 上的反应，在外观上表现为皮肤干燥、粗糙、无光泽、弹性降低、色素沉着、皱 纹等。引起皮肤老化的原因不仅仅是由于年龄的增加，更是由于外界物理因素、 化学因素的影响引起脂质过氧化【1～，使机体内的活性氧增加，从而损伤皮肤细胞 吼外界刺激或损伤引起皮肤细胞自由基的堆积是皮肤衰老的重要原因f4】，因此研 究具有抗自由基作用的化妆品是一个重要课题，是近年柬抗衰老研究的新动向。 本研究的目的是构树叶中提取天然成分，并研究其对表皮细胞的防护作用。 flzvonoidsofBroussonetia 首先，收集构树叶和提取构树总黄酮(total 药渣再用乙醇抽提，混合浸取液，用石油醚除杂质后，上聚酰胺柱，先用蒸馏水洗 脱至无色，再用2000m195％乙醇洗脱，洗脱液经65℃水浴浓缩得到褐黄色固体 2．0089，定性鉴定”1和黄酮类物质的一般性质相符。芦丁为标准品，分光光度法测定 黄酮类物质的含量为7．9l％。加标回收法测得平均回收率为99．53％，并通过抗油脂 氧化反应实验初步判定提取物具有抗氧化性。 细胞的胞体萎缩、胞浆暗、细胞变小、变圆、角质化增强、细胞脱落。初步证实紫外 线对表皮细胞有损伤作用。 最后，通过酶消化表皮细胞，并分别给予不同剂量紫外线、铅、砷，不同剂量的 构树总黄酮TFBP处理细胞，通过噻唑蓝(MTT)染色法检测细胞活性、细胞裂解液 作用。 J／cm2时，细胞的活性开 (1)UVA的剂量从O，46～5．52J，cm2。当剂量高于1．38 J／cm2．添加lO～200mg／l。构树总黄酮后，细胞活 始逐渐减小。固定照射剂量1．38 华中科技犬学同济医学院 硕士毕业生论文 pro增加 到34．50U／mg pro增加到30．28U／mgpro。 pro，GSH—Px活力由16．20U／rag 染毒细胞后，与正常细胞相比，MDA的含量明显升高，SOD活力降低，对GSH．Px 活力的影响不明显。10mg／L的TFBP对醋酸铅引起细胞活性损伤无防护作用，加 高，MDA的含量明显降低，SOD活力升高，GSH．Px的活力变化不明显。 钠对细胞的生长则起抑制作用。采用5．OI．tmol／L的亚砷酸钠染毒细胞后，GSH．Px、 TFBP对亚砷酸钠引起细胞活性损伤无防护 SOD活力降低，差异有显著性。10mg／L SOD活力均有所提高，差异有显著性。 综上所述，在本实验条件下，从构树叶中能够提取得到构树总黄酮，含量为 0．2739／kg。大剂量的紫外线、铅、砷分别作用表皮细胞，可以使细胞的活性降低， 对细胞有损害作用。当添加100～200mg／L的构树总黄酮TFBP后，细胞活性升高， MDA含量明显下降，SOD和GSH．Px活力增强。表明构树叶提取物能够增强细胞 内抗氧化酶的活性，增强机体抗氧化能力，提高细胞的活性，对皮肤的衰老进程 有延缓作用，具有作为有效成分添加到护肤品中的前景。 A；醋酸铅；亚砷酸钠 关键词：TFBP：Ultraviolet 2 华中科技大学同济医学院 硕上毕业生