氧化应激在8-基喹啉铜致HepG2细胞的DNA损伤中的作用.pdfVIP

氧化应激在8．羟基喹啉铜致HepG2细胞的 DNA损伤中的作用 硕士生姓名：林 勃 指导教师：仲来福 教授 专业名称：劳动卫生与环境卫生学 摘 要 目的：8．羟基喹啉铜(Copper 菌剂，在农业生产中使用广泛，可用于预防和控制真菌引起的农业病害。 CuQ性质稳定，将其喷洒于蔬菜、水果等农作物表面，会有一定残留。 CuQ还是一种常用的防腐剂，与水果、蔬菜和其他食物直接接触的木质 容器或包装内也常有CuQ存在。 forResearchonCancer， 国际癌症研究机构(International Agency IARC)将CuQ对人类致癌性归为第三类，即现有证据尚不能就其对人 类致癌性进行分类。CuQ对人类的致癌性有待进一步研究。已有体外实 l00、TAl 02菌株具有 验表明，在s一9存在的条件下，CuQ对TA97、TA 致突变作用，提示CuQ可能具有遗传毒性。肝脏是CuQ的主要代谢器 官和蓄积部位，体内动物实验显示CuQ可以造成肝脏损伤。本文试探讨 CuQ是否可以引起人源肝细胞的遗传毒性及其相关机制。本研究选用人 质细胞的许多功能，还保留了生物转化I相酶和II相酶的活性，被认为 是检测外来化合物遗传毒性的理想细胞系。 本研究选用HepG2细胞作为实验体系，探讨CuQ所致人源肝细胞 的DNA损伤及可能的机制，旨在为评估CuQ对人类健康的危害程度提 供有价值的实验依据。 方法：以HepG2细胞作为实验系统。通过单细胞凝胶电泳(SCGE) 试验检测细胞DNA损伤。为探讨DNA损伤的可能机制，我们用可见光 分光光度法测定过氧化氢酶活性，以苯二醛(OPT)测定细胞内谷胱甘 脂质过氧化水平，以免疫印记法(westernblot)检测细胞核因子NF．rB 的变化，以免疫组化方法检测细胞内8．羟基脱氧鸟苷(8．OHdG)的表达 水平，采用DL．甲硫氨酸磺酰亚胺(BSO)干预法来评价细胞内GSH水 平对CuQ所致DNA损伤效应的影响。 距离明显增加，且呈剂量依赖关系，提示CuQ可引起DNA链断裂。4p,M 增多。伴随剂量的增加及染毒时间的延长，细胞核因子NF．1cB由细胞浆 l 对照组比较，其差别具有统计学意义。采用1501aM的GSH合成特异抑 的损伤，且里剂量依赖关系。 用机制可能是通过细胞内自由基水平升高、细胞内过氧化氢酶活性降低 细胞内重要的抗氧化剂，可降低CuQ引起的DNA损伤效应。 关键词：8．羟基喹啉铜 单细胞凝胶电泳试验 氧化应激 谷胱甘肽 HepG2细胞 2 stressin Theroleofoxidative copper DNA in cells damageHepG2 8-quinolinolate·-induced Master candidate：BoLin degree Laifu Zhong Supervisor：Professor andEnvironmentalHealth Maj