碘化物遗传毒作及其机制初探.pdfVIP

m束夫掌m女目愧j撑位*文 碘化物遗传毒作用及其机制初探 研究生： 叶晓波 专 业： 环境卫生学 导 师： 李杰教授 ， 中文摘要 目的：国内外多数流行病学调查显示碘摄入过多可引起自身免疫 性甲状腺疾病、甲状腺机能亢进、甲状腺机能低下等。已有资料 提示地理性高碘区甲状腺癌发病率较高，应用碘盐预防甲状腺肿 的地区甲状腺乳头状癌的发病率有升高趋势。各国学者已从免疫 学、组织病理学等方面对碘与甲状腺癌的关系进行了较多研究。 但对碘化物可能致癌的分子机制报道较少J／本研究以常规用于防 治碘缺乏病的碘化钾(KI)及碘油染毒体外培养的人胚肺成纤维 (HELF)细胞，先从染色体损伤角度观察微核细胞率的变化，并 从分子水平探讨碘化物对抑癌基因p53表达产物、原癌基因c-myc 及凋亡相关基因Bcl一2、Bax的影响。为碘化物可能遗传毒作用机 制的阐明，进一步完善地方性碘缺乏病的预防措施提供实验和理 论依据。 (方法： 1．微核试验 ml^掌qE±日≈主掌t’*文 mm01／L、4mmol／L)、碘油(100ng／ml、 mmol／L、2 应用KI(1 集细胞，以生理盐水做阴性对照，以丝裂霉素做阳性对照，对其 微核细胞率进行检测。以出现染色与主核完全相同、体积小于主 核的1／4、位于胞浆内的圆形小体为微核阳性。 2．碘化物对p53基因表达产物影响的检测 分别收集不同浓度KI和碘油作用24小时的细胞，ELISA法 测定细胞中P53蛋白的含量。 3．碘化物对原癌基因c—myc表达的影响 分别用不同浓度的KI和碘油作用于细胞，24小时后收集并提 取其RNA，应用RT-PCR技术检测c-myc基因的表达。 4．碘化物对凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响 收集不同染毒浓度的培养细胞，提取其RNA，RT-PCR法检测 结果：KI各染毒组微核细胞率明显升高，与对照组相比有显著性 差异。ELISA结果显示不同浓度KI作用于培养细胞后，胞内P53 蛋白含量明显增加，其差别有统计学意义。RT-PCR结果显示c-myc 表达显著增强，Bcl-2表达量有所上升，Bax表达在2mmot／L时 达到最高值，浓度高于或低于该浓度时均有下降。二者比例增加， 但无统计学差异。而碘油染毒组各项指标均无异常。y 结论：高浓度KI作用于培养的人胚肺成纤维细胞后，可引起微核 细胞率明显升高，使原癌基因c-myc表达增强，可能诱发p53基 因发生变异而使细胞内P53蛋白含量明显增加。此种改变可能是 高碘诱发遗传毒作用及甲状腺癌的分子基础。但不同浓度KI对 Bc卜2／Bax比值无明显影响，说明KI并不是通过这种机制引起HELF 细胞基因及行为的改变。碘油在所用实验剂量下是安全的。 关键词： 碘化钾碘油 微核 抑癌基因 原癌基因 凋亡相 关基因 m束^掌硬女目|究生掌位静i of andits of Iodide The GenetoxicEffect Study the Mechanismon HELFcells Ye GraduateXiaobo Tutor JieLi Abstract lotof has