生殖器溃疡性疾多重PCR诊断方法的研究及危险因素分析.pdfVIP

生殖器溃疡性疾病多重PCR诊断方法的研究及危险因素分析 硕士研究生： 付笑冰 指导教师： 董时富教授 周华博士 中文摘要 chain f多重聚合酶链反应(multiplex reactj po]ymerase on，MPCR)是 根据PCR原理，在其基础上在同一反应体系中加入一对以上的特异的引物对， 如果存在与各引物对特异互补的模板，则可同时在同一反应管中扩增出一条以 上的DNA片段。随着PCR技术的不断发展，其相关技术也在逐步得到完善，多 重PCR以其简便、快捷、经济、一次性诊断多种疾病的优点，被越来越多的应 用到性传播疾病的诊断中，尤其是在西方国家，他们多采用MPCR为手段进行 生殖器溃疡性疾病或其它性传播疾病的临床诊断，流行病学研究。 目前我国性传播疾病流行形势严峻，尤其是以生殖器溃疡为主要表现的性 病，如梅毒、生殖器疱疹等，有逐年增长的趋势，及时准确的诊断是治疗的先 决条件。而现有的临床诊断和实验室诊断均有一定的局限性，从流行病学调查 角度来讲，传统方法也不适应大批量人群的筛查与疾病构成的研究。能否在我 国推行MPCR在临床诊断和流行病学调查中的应用，对于生殖器溃疡性疾病的 诊断、流行病学的调查将有非常重要的意义。我们通过自行设计的一套MPCR 生殖器溃疡病例进行MPCR检测，对其结果进行分析与对比分析，同时对其进 行危险因素的分析。／1’1 本研究分为二个部分，具体如下： 第一部分：MPCR反应检测梅毒螺旋体、单纯性疱疹病毒和杜克雷嗜血杆菌 的研究。 目的：建立多重聚合酶链反应同时检测梅毒螺旋体、单纯疱疹病毒和杜克 雷嗜血杆菌的方法，评价其临床应用价值。 ／ f方法：采用三种标准株建立了同时检测梅毒、生殖器疱疹和软下疳的复合 微镜检查和梅毒血清学检查，HSV抗原酶免疫检测、杜克雷嗜血杆菌培养法的 结果进行对比分析。 纯疱疹病毒感染，2例梅毒螺旋体和单纯疱疹病毒混合感染，未检测出杜克雷 嗜血杆菌阳性者。MPCR对梅毒螺旋体、单纯疱疹病毒的敏感性分别为100％、 93．3％，而暗视野显微镜检查和梅毒血清学检查，HSV抗原酶免疫检测的敏感性 分别为35．3％、50％、100％。广、一 结论：多重PCR方法对梅毒螺旋体检测较常规方法有更高的敏感性，对单 纯疱疹病毒检测虽没有抗原ELISA法敏感，但也有较高的检出率。MPCR可同时 检测出多种病原体，简便、快速、敏感，适合于临床应用及流行病学调查。 第二部分：以生殖器溃疡为主要表现的疾病危险因素分析． 目的：了解深圳市某性病门诊中，以生殖器溃疡为主要表现的疾病有关的 发病危险因素。 ， f方法：采用病例对照的研究方法选取261例GUD与非GuD病人，调查个人 基本社会特征和个人性行为特征，进行单因素的危险度与多因素Logistic回 归分析。 结果：调查发现职业为商人，皮损时有性行为GUD发病的危险因子：经常 使用安全套，高收入，无即往性病史为GUD发病的保护因子∥—矿一 结论：必须针对职业为商人的高危人群加强宣教，推广安全套的使用，提 倡安全的性行为增强防病意识。 关键词：多重聚合酶链反应 梅毒螺旋体 单纯疱疹病毒杜克雷嗜血 杆菌 生殖器溃疡 危险因素 TheStudiesof ChainReaction Multiplex for Polymerase GeMtalUlcerDisease and Risk the facto