丹参注射液对培乳鼠心肌细胞缺糖缺氧损伤的保护作用.pdfVIP

～塑苎±苎兰堕翌圭丝壅兰————一—————兰!!!!主一 中文摘要 目的：(缺血性心脏病是指由于冠状动脉循环改变引起冠状 血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害，它是一种严重 危害人民健康的常见病。心肌缺血性损伤常指由各种原因引起 的心肌供血量绝对性不足或相对性减少，使心肌血液供求失衡 而出现的一种心肌细胞损伤的现象。这种心肌细胞的损伤既可 发生在心肌缺血期，也可出现在血管再通、血液再灌注之后√ 为了研究开发传统中医药对缺血性心脏病的作用，本实验采用 丹参注射液对体外培养的大鼠乳鼠心肌细胞缺糖缺氧损伤(缺 血性损伤)进行干预，观察其对损伤心肌细胞的保护作用，并 进一步探讨其机理．值得一提的是发现和证实丹参注射液对缺 血性损伤诱导心肌细胞凋亡的影响，也将对其影响心肌细胞凋 亡进行了讨论。为丹参制剂在防治缺血性心脏病的应用提供新 的科学依据，机理上增添了新的观点。 ／方法：参考Deluca及Acosta方法，稍加改进复制心肌细胞 缺血性损伤模型。将体外原代培养第4天的心肌细胞随机分为 四组(每组8瓶细胞)：正常对照组(A组)，缺糖缺氧组(B 组，模型组)，小剂量丹参注射液组(C组，7．5∥1)，大剂量丹 参注射液组(D组，159／1)，其中B、C、D组细胞换成无血清 的DMEM培养24h使其同步化。然后将B组培养基倒掉，换成 磷酸缓冲液(PBS，PH=7．4)3ml，C、D两组分别换成含不同浓度 丹参注射液的PBS 3ml。灌以99．9999％的氮气(N2)10分钟， 塞紧胶塞，37℃温育6h。取四组培养液上清检测乳酸脱氢酶 (LDH)、0【一羟丁酸脱氢酶(o【．HBDH)，收集细胞分别做透射 电镜及细胞凋亡的检测。 湖北tp喱荦院硕士研究生 于B组(Po．05)，而稍高于A组，但无显著性差异(Po．05)； 丹参注射液能稳定细胞膜，有效降低缺糖缺氧心肌细胞损伤时 乳酸脱氢酶及0【．羟丁酸脱氢酶的漏出。 (2)形态和超微结构变化：倒置显微镜下可以看到正常培 养心肌细胞胞膜完整，胞浆透亮，透射电镜下线粒体结构完好；缺 糖缺氧心肌细胞其内有空泡形成，颗粒增加，甚至细胞有变性 坏死，电镜下可见线粒体肿胀，胞膜甚不完整。两种剂量丹参注 射液组细胞也有少量空泡形成，细胞核尚正常，呈圆形或椭圆 形，电镜下仅见少许线粒体肿胀，嵴少，两组间超微结构变化 不大，与正常组心肌细胞超微结构相近。说明缺糖缺氧组心肌 细胞超微结构破坏严重，丹参注射液对堡蕉迭氢翅笾有较好的 保护作用。 (3)心肌细胞凋亡：A组心肌细胞也有一定的凋亡，而B组 心肌细胞凋亡数量明显上升，与A组相比有显著性差异(P 0．01)。c、D组心肌细胞凋亡数量无显著性差异(Po．05)， 与B组相比明显下降(P0．05)，但仍比A组稍多，无显著性 差异(PO．05)。说明凋亡是缺糖缺氧时心肌细胞死亡的重要方 式，其细胞凋亡数量明显增多。丹参注射液可以明显降低这种 损伤时心肌绳胞的凋亡，从而对心肌细胞缺糖缺氧损伤起到保 护侮硪。)√ 结论：丹参注射液对体外培养心肌细胞缺糖缺氧(缺血性) 损伤有较好的保护作用，其作用是通过稳定细胞膜，降低损伤 时细胞内酶的漏出，减轻心肌细胞缺血性损害超微结构及形态 学的变化，降低心肌细胞凋亡而起到保护作用。证实了丹参注 射液在细胞水平和分子水平上保护心肌细胞的缺糖缺氧性损 湖北tP医学院硕士研究生 毕业论文 伤，为丹参注射液在心血管领域的应用提供了新的依据。 主题词： 塑些!垦堂堕翌兰=竺查垒一一 一———————————————!翌竖!．!己一 ABSTRACT a diseasewhich iS serious heartdisease obiective：lschemic flowand causedtheimbalancebetween