电针对抑郁模型鼠行为学、海马形态结构和海马nNOS mRNA及BDNF蛋白表达的影响.pdf

中文摘要 中文摘要 情感性障碍，是以抑郁心境自我体验为中心的临床症状群或状态。抑郁症给世界各国人 民带来了巨大危害，虽然历经数百年研究，至今现代医学离彻底阐明抑郁症本质、最终 治愈抑郁症的目标相去甚远。而针灸治疗抑郁症由来已久，以其疗效确实，无明显副作 用为特点。因此如何发挥针灸治疗抑郁症的优势，揭示针灸治疗抑郁症的机理，从而进 一步提高抑郁症的治疗效果，是亟待深入探索的问题。 目的：通过电针对抑郁模型大鼠的干预，观察电针对抑郁模型大鼠行为学、脑内 各脑区形态结构及海马区某些分子水平的变化，探讨电针抗抑郁症的机理。 方法：①采用慢性应激的方法建立sD大鼠的抑郁模型： ②通过开野实验和糖水实验观察电针1二预抑郁模型大鼠后的形态学变化； ⑤通过核磁共振成像技术(MRI)、电镜技术和TdT酶介导的原位末端标记法等技术， 观察电针干预抑郁模型大鼠后，各组大鼠脑内形态学和各脑区信号强度的改变，以及海 马区神经元形态结构的变化； ④通过RT—PCR方法和Westernb]ot方法，分别观察电针二f预抑郁模型大鼠后海马 区nNOS mRNA表达的变化和BDNF蛋白表达的变化。 结果：①实验结果表明，在遭受3周慢性应激后，模型组大鼠体重增长缓慢，与 正常组相比，体重增长明显下降；同时电针组大鼠体重增长与正常组相比也明显降低， 而与模型组相比有降低的趋势、但无显著性差异。模型组大鼠糖水摄入量减少，表现了 对奖赏刺激(1％蔗糖水美味食物)的低敏感，类似于人类抑郁症的快感缺失状态；电针 组大鼠糖水摄入量增加，接近基线水平，并与模型组相比有明显差异，提示电针可以增 加大鼠对奖赏刺激的敏感性、改善大鼠的快感缺失。模型大鼠水平运动和垂直运动的次 数明显减少、活动性降低，提示模型大鼠对外界环境的探究兴趣减低：电针1组也表现出 活动性降低，与模型组相比并无显著性差异，不同于文献报道。 ②MRI结果显示模型组和电针组与正常组相比较，中脑水管的横截面积有增加，统 计结果显示三组之间有显著性差异；对T2值的分析结果显示，电针组和正常组的海马 区T2值接近，而模型组的海马区T2值与电针组和正常组相比较有增加，其海马区T2 值与电针组相比较有显著性差异，其它脑区，如尾壳核、杏仁核和皮层，T2值在三组之 间并无明显差别：对扩散加权象的数据处理结果显示，模型组和电针组海马区和颞叶及 听觉皮质区的ADC值(表观扩散系数)相对于正常组有降低，并且与正常组相比都有显 著性差异；而纹状皮质区的ADC值三组之问无显著差异。 ③电镜观察凋亡细胞主要集中在模型组和电针组；TUNEL检测结果显示：模型组和 电针组凋亡细胞平均数远高于正常组，有极显著的差异性(PO．01)；电针组的凋亡细 胞平均数大大低于模型组，也有极显著的差异性(P0．01)。 mRNA的含量明显低于难常组和 ④RT—PCR的结果显示，模型组大鼠海马组织nNOS 电针组，这与已有结论不一致。结合本课题实验一、二、三可知，模型组大鼠海马组织 mRNA含量的降低。但是，nNOS 受损，神经元数量绝对值也会减少，因此也会导致nNOS 电针对抑郁模型大鼠行为学、海马形态结构和海马nNOS mRNA及BDNF蛋白表达的影响 mRNA含量的降低是引起抑郁模型大鼠海马组织损伤的原因，还是海马组织损伤后导致的 结果，后续研究将进一步进行。 @)Western blot的结果表明模型组与正常组、电针组相比，大鼠海马组织的BDNF 蛋白表达水平明显下降，差异具有统计学意义；电针组的BI)NF蛋白表达水平虽也有下 降，但与正常组的差异不显著。 结论：①本课题从行为学、形态学和分子水平证实了电针具有抗抑郁的效果；②MRI 研究表现的是好坏参半的结果，提示以动物为对象来研究针刺机理，必须注意受试主体 的心理作用对实验指标乃至实验结论的影响；③慢性应激抑郁模型大鼠存在海马神经元 凋亡现象，持续的电针干预可抑制慢性应激造成的大鼠海马神经元凋亡，对大鼠脑损伤 具有一定的保护作用；④RT—PCR的结果与既往已有文献结论不一致，为此，我们假