脂肪细胞共培养及其白介素-6、抵抗素对HepG2细胞ABCA1表达的影响及其可能机制探讨.pdfVIP

万方数据 表达的影响及可能机制探讨 摘要 背景 肥胖尤其是腹型肥胖是代谢综合征的重要组成部分，并常伴有高 密度脂蛋白胆固醇水平明显减低。脂肪组织作为重要的内分泌器官在 肥胖时分泌异常的脂肪因子如白细胞介素．6(IL．6)、抵抗素 的代谢。肥胖时紊乱的脂肪因子对肝脏HDL生成是否产生作用，并 且此作用是否与miR-33相关暂不清楚。 目的 建立脂肪细胞与肝细胞共培养模型，探讨促分化成熟脂肪细胞及 miR-33a／b及SREBP2／lc等的影响。 方法 培养小鼠3T3一L1前体脂肪细胞，诱导分化至成熟的脂肪细胞； 由行腹部外科手术患者的皮下脂肪组织中分离培养人脂肪源问充质 干细胞(ADSCs)，诱导分化14天至成熟的脂肪细胞。将人肝癌细胞 脂肪细胞共培养48小时；另外将HepG2细胞分别与未促分化的人 HepG2设为正常对照组。提取各组细胞的蛋白及总RNA，通过 lI 万方数据 Western 光定量PCR(Real．time 干预的HepG2细胞为对照组，干预24小时后提取各组细胞的蛋白及 总RNA，通过Western 表达量；Real—time SREBP一2，ABCAl，APOAl基因的相对表达量。 结果 l、与小鼠脂肪细胞或人脂肪细胞共培养均可降低HepG2细胞 mRNA 表达下降(PO．05)； 2、与对照组相比，10ng／ml 化(胗O．05)； 3、与对照组相比，50、100ng／ml ABCAl蛋白表达明显下降(P0．05)；25ng／ml mRNA表达均无明显影响(尸0．05)； 对HepG2细胞ABCAl、ApoAl 4、与小鼠脂肪细胞或人脂肪细胞共培养可诱导HepG2细胞 SREBP2／miRl33a及SREBP一1c／miR-33b表达下降俨0．05)； SREBP一1c／miR-33b表达均无明显变化(胗o．05)。 结论 应用通透性隔离腔(Transwellchamber)系统构建小鼠或人脂肪 细胞与人肝癌细胞株HepG2细胞共培养的模型可以诱导HepG2细胞 mRNA表达下调，可能是肥胖状 ABCAl蛋白、mRNA以及ApoAl Ill 万方数据 态伴有低HDL．C的原因之一； 肪组织分泌的脂肪因子影响HDL的形成。 (图19幅，表1个，参考文献115篇) 关键词：肥胖；共培养；3T3．L1细胞；人脂肪细胞；HepG2细胞； 高密度脂蛋白；三磷酸腺苷结合转运子A1；微小RNA-33 中图分类号：R589．2 IV 万方数据 Effectof andResistinon Coculture，IL-6 Adipocyte in CellsandItsMechanisms ofABCAI Expression HepG2 ABSTRACT Background visceral isa of Obesityespecially obesitysignificantcomponent meta