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第三章 遗传与基因工程 基因工程的别名是什么？ 这种技术的操作环境是什么？ 该技术是从什么水平上施工的？ 该技术的基本过程是什么？ 三　基因工程简介 一、基因工程的概念 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 DNA分子水平 剪切 拼接 导入 表达 抗虫棉 普通棉 科学家从苏云金芽孢杆菌中提取出毒蛋白基因，并成功的导入棉细胞内使之合成毒蛋白。 二、基因工程操作的工具 基因的剪刀——限制性内切酶 基因的针线——DNA连接酶 基因的运输工具——运载体 主要存在于微生物中，能识别特定的核苷酸序列，并且在特定切点上切割DNA。 可以把两种来源的DNA（用同一种限制酶切割）的黏性末端黏合起来。 把外源基因送入受体细胞的工具。 三、基因操作的基本步骤 剪切 拼接 导入 表达 （一）提取目的基因 （二）目的基因与运载体结合 （三）将目的基因导入受体细胞 （四）目的基因的检测和表达 练习 2．有关基因工程的叙述正确的是 ( ) A.限制性内切酶只在获得目的基因时才用 B.重组质粒的形成在细胞内完成 C.质粒都可以作为运载体 D.蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 D 1．在基因工程中用来修饰改造生物基因的工具酶 是： ( ) A．限制酶和连接酶 B．限制酶和水解酶 C．限制酶和运载体 D．连接酶和运载体 A 练习 3．质粒是基因工程最常用的运载体，它的主要特点 是： ( ) ①能自主复制　 ②不能自主复制　 ③结构很小 ④蛋白质　 ⑤环状RNA　 ⑥环状DNA ⑦能“友好”地“借居” A．①③⑤⑦　B．②④⑥ C．①③⑥⑦　D．②③⑥⑦ C 4．细菌抗药性基因存在于 ( ) A．核DNA B．质粒 C．RNA D．小的直线型DNA B G A A T T C C T T A A G G C T T A A 黏性末端：被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间碱基正好互补配对。 A A T T C G 返回 DNA连接酶: 作用：可以把两种来源的DNA（用同一种限制 酶切割）的黏性末端黏合起来。 返回 2、作为运载体必须具备哪些条件？ ⑴.能在受体细胞中复制并稳定保存。 ⑵.具有多个限制酶切口，便于与外源基因连接 ⑶.具有标记基因，便于筛选。 3、常用的运载体有哪些？ 1、什么是质粒？ 质粒、噬菌体和动植物病毒 存在于许多细菌以及酵母菌等生物中，是细胞染色体外能自主复制的很小的环状DNA分子。 返回 步骤一 提取目的基因 1.什么是目的基因？ 2.提取目的基因的途径有几种？ 用以改造生物性状的遗传物质，即人们需要的外源基因。 鸟枪法 人工合成法 鸟枪法：散弹射击法 供体细胞DNA 限制酶 许多DNA片段 载入 运载体 导入 受体细胞 扩增 产生特定性状 分离 目的基因 外源DNA的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制；目的是提高目的基因的含量，便于筛选。 什么叫扩增？目的是什么？ 目的基因的mRNA 逆转录 单链DNA 合成 双链DNA（目的基因） 蛋白质氨基酸序列 推测 mRNA的核苷酸序列 推测 结构基因的核苷酸序列 化学合成 目的基因 人工合成法 逆转录法 根据已知氨基酸序列直接合成DNA 返回 返回