实验微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌教案解析.ppt

实验一 微生物学实验常用仪器洗涤及干热灭菌 目 的 要 求 认识微生物实验所需要的各种器皿，了解常用工具和仪器的名称、用途。 掌握对玻璃器皿的清洗、包扎方法与干热灭菌的操作过程。 实验原理 微生物学实验要求较高的无菌状态，因此，实验所用的器皿，大多数要进行消毒、灭菌从而用以培养微生物，所以对其质量、规格、洗涤和包扎方法均有一定要求。 实 验 材 料 实验程序Ⅰ（仪器的认识、清洗与包扎） 由一底一盖组成一套，常用的培养皿皿底直径90 mm，高15mm,皿底皿盖均为玻璃制成。 制成平板，可用于分离、纯化、鉴定菌种、活菌计数以及测定抗生素、噬菌体的效价等。 大试管(约18mm×180mm) : 可装倒平板用的培养基； 可作制备斜面用； 装液体培养基用于微生物的振荡培养 (2)中试管[(13～15)mm×(100～150)mm]: 装液体培养基培养细菌或做斜面用； 用于细菌、霉菌、病毒等的稀释和血清学试验。 (3)小试管[(10～12)mm×100mm]: 一般用于糖发酵或血清学试验，和其它需要节省材料的试验。 三角瓶 用来装无菌水、培养基和振荡培养微生物等。 烧杯 用来配制培养基与各种溶液等。 玻璃吸管 （二）学习玻璃器皿的洗涤方法 1、新玻璃器皿的洗涤 在2%的盐酸溶液中浸泡数小时，用自来水冲洗干净。 2、旧玻璃器皿的洗涤 （1）试管、培养皿、三角瓶：洗衣粉和去污粉洗刷，自来水冲洗 A 装有固体培养基：刮掉，洗涤 B 带菌的器皿：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时或煮沸0.5小时，然后洗涤 C 带病原菌培养物的器皿：先高压蒸汽灭菌，倒去培养物 （2）玻璃吸管：吸管尖端与装在水龙头上的橡皮管连接，反复冲洗 a 吸过血液、血清、糖溶液或染料溶液等的玻璃吸管：立即投入盛有自来水的容器中浸泡，实验后集中冲洗。 b 塞有棉花的吸管：用水将棉花冲出，然后冲洗 c 吸过含有微生物培养物的吸管：2%来苏尔或0.25%新洁尔灭消毒液中浸泡24小时然后洗 d 吸管内壁有油垢：洗涤液中浸泡数小时，再冲洗 （三）学习各种器皿的包扎 培养皿的包扎： 培养皿常用旧报纸紧紧包裹，一包7～10套，包好后干热或湿热灭菌。 也可用金属筒包装。 吸管的包扎： 1 在上端约0.5cm处，塞入一小段1.5 cm长的棉花（勿用脱脂棉），目的是避免将外界或嘴中杂菌吹入管内，或不慎将菌液吸出管外。 2 4～5 cm宽的长纸条. 试管和三角瓶等的包扎： 试管口和三角瓶瓶口塞棉花塞或硅胶塞； 用二层报纸包扎好（如有牛皮纸，效果更好），进行干热或湿热灭菌。 试管较多时，一般7个或10个一组，再用双层报纸包扎。 实验程序Ⅱ（干热灭菌的操作方法 ） 结果与思考题 1、通过本次实验你认识了微生物学实验常用的哪些器皿？ 2、简述玻璃器皿洗涤的基本要求。 3、简述干热灭菌的操作步骤。 * * 干热灭菌是利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。 与湿热灭菌相比，干热灭菌所需温度要高（160～170℃），时间要长（1～2h），但干热灭菌温度不能超过180℃，否则，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。 玻璃仪器： Ａ每人数：培养皿 3套； 大试管 3只。 Ｂ每组数：三角瓶 6只； 烧杯（500ml）2只； 烧杯（1000ml）1只； 小试管 6只； 吸管（ 0.2ml 2支， 0.5ml 2支，1ml 2支）共6支 Ｃ每橱数：量筒（500ml）1只； 洗涤用品： 去污粉、肥皂、清洗剂、毛刷等。 包扎用品：棉花、扎绳、包扎纸等。 （一）学习下列常用仪器的种类、规格和应用范围： 培养皿 试管 洗净后的试管倒置于试管筐内，三角瓶倒置于洗涤架上，培养皿的皿底和皿盖分开，依次压着皿边排列倒扣在桌上,晾干. 洗涤后，若内壁的水均匀分布成一薄层，表示完全洗净，若还挂有水珠，则需用洗涤液浸泡数小时，然后再用自来水冲洗。 视频：玻璃器皿的包扎 1．装入待灭菌物品 将包好的待灭菌物品放入电烘箱内，关好箱门。物品不要摆得太